本試劑盒基于常規(guī)PCR擴(kuò)增技術(shù)，針對(duì)A群溶血性鏈球菌保守特異性基因設(shè)計(jì)專屬引物與反應(yīng)體系，可特異性擴(kuò)增目標(biāo)核酸片段，實(shí)現(xiàn)對(duì)A群溶血性鏈球菌的精準(zhǔn)定性檢測(cè)。產(chǎn)品操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)周期短、特異性優(yōu)異，不會(huì)與其他菌群發(fā)生交叉反應(yīng)，可用于食品樣本、臨床咽喉拭子、環(huán)境樣本中A群溶血性鏈球菌的快速篩查與檢測(cè)，適配公共衛(wèi)生監(jiān)測(cè)及臨床微生物檢測(cè)場(chǎng)景。
產(chǎn)品名稱 | 溶血性鏈球菌A群PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P015232 |
英文名稱 | Group A Hemolytic Streptococcus PCR Detection Kit | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
處理咽拭子、血液等臨床樣本，去除蛋白、多糖雜質(zhì)后純化致病菌 DNA。
選用 A 群鏈球菌專屬保守基因引物，僅特異性擴(kuò)增該菌群靶標(biāo)核酸片段。
PCR 完成后電泳檢測(cè)目標(biāo)條帶，條帶陽性提示樣本含 A 群溶血性鏈球菌。
?操作步驟?：
DNA提?。颖局苽鋮^(qū)）
使用自選方法或兼容的核酸提取試劑盒純化樣本DNA，確保無抑制劑殘留。
標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（樣本制備區(qū)）
標(biāo)記6支離心管為7至2號(hào)，每管加入45 μL DEPC-H2O（需使用帶濾芯槍頭）。
梯度稀釋陽性對(duì)照：
7號(hào)管：加入5 μL 1×10^8拷貝/μL陽性對(duì)照，震蕩混勻，得1×10^7拷貝/μL標(biāo)準(zhǔn)品；
依次稀釋至2號(hào)管，最終濃度跨5個(gè)數(shù)量級(jí)（1×10^7至1×10^3拷貝/μL）。
所有標(biāo)準(zhǔn)品置于冰上備用，避免反復(fù)凍融。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)液避光解凍后渦旋混勻，短暫離心分裝至PCR管。
每反應(yīng)體系20 μL，含預(yù)混引物、熒光染料及緩沖液。
加樣（樣本處理區(qū)）
分別加入5 μL待測(cè)DNA或標(biāo)準(zhǔn)品至反應(yīng)管，陰性對(duì)照以DEPC-H2O替代。
蓋緊管蓋，避免氣泡干擾。
PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
按以下程序運(yùn)行定量PCR儀：
預(yù)變性：95℃ 2分鐘；
循環(huán)階段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)）；
熔解曲線分析（可選）。
?注意事項(xiàng)?：
試劑盒含生物源性質(zhì)粒模板，操作全程佩戴手套、口罩，陽性模板僅在生物安全柜開蓋；
所有一次性耗材、PCR 廢液、電泳凝膠實(shí)驗(yàn)后 121℃高壓滅菌再丟棄；
試劑避免反復(fù)凍融，單次融化冰上放置不超過 2 h，使用完畢立即放回 - 20℃；
移液器吸頭一次性使用，禁止重復(fù)吸取，防止交叉污染；
試劑盒僅用于科研檢測(cè)，嚴(yán)禁人臨床體外診斷；
擴(kuò)增產(chǎn)物區(qū)產(chǎn)物不可帶回試劑、提取區(qū)，防止氣溶膠大面積污染實(shí)驗(yàn)室；
若陰性對(duì)照持續(xù)出現(xiàn)雜帶，全部更換全新試劑盒，實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面、移液器紫外過夜消毒。
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關(guān)鍵字： 溶血性鏈球菌A群;PCR檢測(cè)試劑盒;
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