本試劑盒采用熒光PCR檢測(cè)技術(shù)，融合特異性引物與熒光探針雙重識(shí)別機(jī)制，靶向溶血性鏈球菌特異性基因序列進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)。相較于常規(guī)PCR，該試劑盒靈敏度更高、定量更精準(zhǔn)，可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增過(guò)程，有效規(guī)避假陽(yáng)性、假陰性結(jié)果，檢測(cè)結(jié)果直觀(guān)易判讀。適用于臨床感染樣本、食品、環(huán)境樣本中溶血性鏈球菌的快速定性定量檢測(cè)，滿(mǎn)足高精度微生物檢測(cè)需求。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 溶血性鏈球菌熒光PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P015233 |
英文名稱(chēng) | Hemolytic Streptococcus Fluorescent PCR Detection Kit | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
樣本核酸純化后加入 TaqMan 熒光探針、特異性引物，構(gòu)建實(shí)時(shí)熒光擴(kuò)增體系。
擴(kuò)增過(guò)程中探針結(jié)合靶序列被 Taq 酶水解，釋放熒光信號(hào)，儀器實(shí)時(shí)采集熒光強(qiáng)度。
根據(jù)擴(kuò)增曲線(xiàn) Ct 值判定樣本陽(yáng)性陰性，定量反映樣本內(nèi)致病菌載量高低。
?操作步驟?：
樣本制備：
使用CTAB法或商業(yè)DNA提取試劑盒從組織中提取基因組DNA。
建議DNA濃度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
反應(yīng)體系配制（20 μL體系示例）：
預(yù)混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）
特異性引物混合液
模板DNA（2~5 μL）
補(bǔ)充無(wú)核酸酶水至終體積。
PCR擴(kuò)增程序：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)）；
熔解曲線(xiàn)分析：60~95℃（可選，用于驗(yàn)證擴(kuò)增特異性）。
結(jié)果判讀：
陽(yáng)性：Ct值≤35且熔解曲線(xiàn)峰單一；
陰性：Ct值≥40或無(wú)擴(kuò)增曲線(xiàn)；
可疑：35<Ct值<40，建議復(fù)測(cè)或結(jié)合熔解曲線(xiàn)分析。
?注意事項(xiàng)?：
所有耗材必須無(wú)核酸酶，吸頭一次性使用，禁止重復(fù)吸??；
陽(yáng)性模板拷貝濃度高，開(kāi)蓋操作輕柔，避免氣溶膠擴(kuò)散造成全域污染；
試劑融化后冰上放置不超過(guò) 2 h，用完立即放回 - 20℃；
廢棄 PCR 管、擴(kuò)增產(chǎn)物、實(shí)驗(yàn)廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄；
試劑盒僅用于動(dòng)植物、水產(chǎn)、微生物疫病科研檢測(cè)，禁止人體臨床檢測(cè)；
移液器、操作臺(tái)定期紫外消毒，長(zhǎng)期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
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關(guān)鍵字： 溶血性鏈球菌熒光;PCR檢測(cè)試劑盒;
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