軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗體
原理特點(diǎn)
軟骨寡聚基質(zhì)蛋白是軟骨特異性基質(zhì)蛋白，維持軟骨纖維結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，調(diào)控軟骨細(xì)胞黏附、增殖與分化，是軟骨損傷、關(guān)節(jié)病變的靈敏標(biāo)志物。該抗體可特異性識(shí)別該基質(zhì)蛋白抗原，檢測體液與軟骨組織中蛋白表達(dá)水平，精準(zhǔn)評(píng)估軟骨損傷程度與關(guān)節(jié)病變進(jìn)展；同時(shí)可封閉蛋白功能位點(diǎn)，破壞軟骨基質(zhì)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞功能異常，適用于骨關(guān)節(jié)疾病發(fā)病機(jī)制與修復(fù)研究。
英文名稱:COMP Rabbit pAb
中文名稱:軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Cartilage oligomeric matrix protein; Cartilage oligomeric matrix protein precursor; EDM 1; EDM1; EPD 1; EPD1; Epiphyseal dysplasia 1; Epiphyseal dysplasia 1 multiple; Epiphyseal dysplasia multiple 1; MED; MGC13181; MGC149768; PSACH; Pseudoachondroplasia; THBS 5; THBS5; Thrombospondin 5; Thrombospondin5.
交叉反應(yīng):Human
抗體來源:Rabbit
免疫原:Recombinant human COMP protein
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
克隆號(hào)：None
理論分子量：83 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點(diǎn)背景
靶點(diǎn)背景：軟骨細(xì)胞分泌基質(zhì)蛋白，穩(wěn)定膠原纖維網(wǎng)絡(luò)；關(guān)節(jié)損傷、骨關(guān)節(jié)炎早期血清與組織標(biāo)志物，損傷早期釋放升高。
作用原理：COMP 全長重組蛋白制備特異性抗體，無其他基質(zhì)蛋白交叉。
產(chǎn)品特點(diǎn)：血清 ELISA 可早期篩查關(guān)節(jié)損傷；軟骨修復(fù)、關(guān)節(jié)炎藥物療效評(píng)價(jià)。
核心實(shí)驗(yàn)操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過夜；或室溫孵育1-2小時(shí)，孵育時(shí)保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標(biāo)記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時(shí)。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度調(diào)整曝光時(shí)間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過夜；次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標(biāo)記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時(shí)間），蘇木素復(fù)染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細(xì)胞爬片上，4℃避光孵育過夜；室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標(biāo)記二抗（如FITC標(biāo)記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實(shí)驗(yàn)
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時(shí)；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過夜。
檢測：洗滌后加入酶標(biāo)二抗（1:5000），37℃孵育1小時(shí)；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應(yīng)后，酶標(biāo)儀450nm波長讀取OD值。
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關(guān)鍵字： 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗體;Rabbit;83 kDa;
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