本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)原理，酶標(biāo)板微孔包被抗人軟骨寡聚蛋白特異性抗體。檢測(cè)過(guò)程中，樣本中的COMP抗原與固相抗體特異性結(jié)合，孵育洗滌后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記二抗，形成夾心免疫復(fù)合物，經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后測(cè)定吸光度，吸光度與COMP含量正相關(guān)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)現(xiàn)定量分析。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人軟骨寡聚蛋白(COMP)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E3522 |
英文名稱 | COMP ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢出 0.088ng/mL
檢測(cè)范圍：0.28ng/mL～17.92ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：37℃孵育 66min，酶標(biāo)二抗 54min，避光顯色 19min
保存條件：2～8℃冷藏，COMP 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品分裝凍存 - 20℃可存 2 個(gè)月
顯色系統(tǒng)：預(yù)制一體式 TMB 顯色液
檢測(cè)波長(zhǎng)：僅 450nm 波長(zhǎng)讀數(shù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換濃度后線性回歸繪圖
注意事項(xiàng)：關(guān)節(jié)滑液樣本需過(guò)濾后檢測(cè)，軟骨碎屑會(huì)造成孔內(nèi)非特異性吸附
儲(chǔ)存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑室溫復(fù)溫 30min，稀釋濃縮洗滌緩沖液；固定酶標(biāo)板框架區(qū)分各類孔位。
梯度 COMP 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL 加入標(biāo)準(zhǔn)孔，待測(cè)稀釋樣本 50μL 加入樣本孔，空白孔留空。
非空白孔加入一步法酶聯(lián)檢測(cè)抗體工作液 100μL，封板封口輕微震蕩。
37℃恒溫避光孵育 64min，穩(wěn)定孵育環(huán)境。
傾倒廢液，洗滌液加滿每孔浸泡 30s，重復(fù)洗板 5 次，倒置拍干水分。
每孔加入顯色底物 A、B 各 50μL，37℃避光顯色 16min。
滴加終止液 50μL 混勻，10min 內(nèi) 450nm 讀數(shù)，計(jì)算軟骨寡聚蛋白濃度。
關(guān)鍵字： 人軟骨寡聚蛋白;COMP;ELISA試劑盒;
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