產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | FITC標記的增強型藍色熒光蛋白單克隆抗體 | 貨號 | YS-K9264 |
英文名稱 | EBFP Mouse mAb, FITC conjugated | 用途 | 僅供科研實驗 |
商品介紹
英文別名：Blue Fluorescent Protein; Enhanced Blue Fluorescent Protein.
靶標：EBFP（增強型藍色熒光報告蛋白）
熒光基團：FITC；Ex493 nm/Em528 nm
抗體類型：小鼠單克隆抗體
用途：WB、IF、流式，示蹤 EBFP 標記質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、細胞示蹤、報告基因檢測
應用稀釋：WB 1:500–1:3000；IF 1:200–1:1000
儲存：-20℃避光保存
原理特點
該單克隆抗體經(jīng)FITC熒光標記，特異性識別增強型藍色熒光蛋白（EBFP），可有效彌補EBFP自發(fā)熒光弱、易淬滅、固定樣本信號丟失的問題。EBFP是常用的藍色熒光報告標簽，用于多色熒光共定位實驗，該抗體特異性強、無其他熒光蛋白交叉識別，可高效標記EBFP融合蛋白，適配免疫熒光成像、轉(zhuǎn)基因樣本檢測、多色蛋白共定位分析。
靶點背景
1. EBFP 為優(yōu)化型藍色報告熒光蛋白，激發(fā)發(fā)射光譜區(qū)別綠 / 紅熒光，適配多色標記
2. 用于多基因共轉(zhuǎn)染多通道示蹤、不同蛋白亞細胞區(qū)分定位
3. 多色免疫熒光、雙 / 三質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染陽性細胞鑒定實驗
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實驗優(yōu)化與注意事項
抗體濃度優(yōu)化
方陣滴定法：設(shè)置一抗?jié)舛忍荻龋ㄈ?/span>1:200, 1:500, 1:1000）和二抗?jié)舛忍荻龋x擇信噪比最高的組合
預實驗：首次使用建議進行濃度梯度預實驗，確定最佳工作濃度
樣本處理要點
細胞樣本：貼壁細胞用細胞刮收集，懸浮細胞離心收集，盡量吸盡上清避免殘留培養(yǎng)基
組織樣本：新鮮組織建議液氮速凍后-80℃保存，避免反復凍融
磷酸化蛋白：全程冰上操作，加入磷酸酶抑制劑防止蛋白去磷酸化
結(jié)果判斷與分析
WB：觀察是否出現(xiàn)特異性條帶，陰性對照應無條帶或明顯弱于陽性對照
IHC：陽性信號應定位于目標蛋白的正常亞細胞結(jié)構(gòu)（如細胞核、細胞膜）
IF：觀察熒光信號是否與目標蛋白亞細胞定位一致，DAPI染色定位細胞核
關(guān)鍵字： FITC標記的增強型藍色熒光蛋白單克隆抗;EBFP Mouse mAb, FITC;100ul;
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