產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | FITC標(biāo)記的增強(qiáng)型藍(lán)色熒光蛋白單克隆抗體 | 貨號(hào) | YS-K9264 |
英文名稱 | EBFP Mouse mAb, FITC conjugated | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
商品介紹
英文別名：Blue Fluorescent Protein; Enhanced Blue Fluorescent Protein.
靶標(biāo)：EBFP（增強(qiáng)型藍(lán)色熒光報(bào)告蛋白）
熒光基團(tuán)：FITC；Ex493 nm/Em528 nm
抗體類型：小鼠單克隆抗體
用途：WB、IF、流式，示蹤 EBFP 標(biāo)記質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、細(xì)胞示蹤、報(bào)告基因檢測(cè)
應(yīng)用稀釋：WB 1:500–1:3000；IF 1:200–1:1000
儲(chǔ)存：-20℃避光保存
原理特點(diǎn)
該單克隆抗體經(jīng)FITC熒光標(biāo)記，特異性識(shí)別增強(qiáng)型藍(lán)色熒光蛋白（EBFP），可有效彌補(bǔ)EBFP自發(fā)熒光弱、易淬滅、固定樣本信號(hào)丟失的問題。EBFP是常用的藍(lán)色熒光報(bào)告標(biāo)簽，用于多色熒光共定位實(shí)驗(yàn)，該抗體特異性強(qiáng)、無其他熒光蛋白交叉識(shí)別，可高效標(biāo)記EBFP融合蛋白，適配免疫熒光成像、轉(zhuǎn)基因樣本檢測(cè)、多色蛋白共定位分析。
靶點(diǎn)背景
1. EBFP 為優(yōu)化型藍(lán)色報(bào)告熒光蛋白，激發(fā)發(fā)射光譜區(qū)別綠 / 紅熒光，適配多色標(biāo)記
2. 用于多基因共轉(zhuǎn)染多通道示蹤、不同蛋白亞細(xì)胞區(qū)分定位
3. 多色免疫熒光、雙 / 三質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染陽性細(xì)胞鑒定實(shí)驗(yàn)
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實(shí)驗(yàn)優(yōu)化與注意事項(xiàng)
抗體濃度優(yōu)化
方陣滴定法：設(shè)置一抗?jié)舛忍荻龋ㄈ?/span>1:200, 1:500, 1:1000）和二抗?jié)舛忍荻?，選擇信噪比最高的組合
預(yù)實(shí)驗(yàn)：首次使用建議進(jìn)行濃度梯度預(yù)實(shí)驗(yàn)，確定最佳工作濃度
樣本處理要點(diǎn)
細(xì)胞樣本：貼壁細(xì)胞用細(xì)胞刮收集，懸浮細(xì)胞離心收集，盡量吸盡上清避免殘留培養(yǎng)基
組織樣本：新鮮組織建議液氮速凍后-80℃保存，避免反復(fù)凍融
磷酸化蛋白：全程冰上操作，加入磷酸酶抑制劑防止蛋白去磷酸化
結(jié)果判斷與分析
WB：觀察是否出現(xiàn)特異性條帶，陰性對(duì)照應(yīng)無條帶或明顯弱于陽性對(duì)照
IHC：陽性信號(hào)應(yīng)定位于目標(biāo)蛋白的正常亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)（如細(xì)胞核、細(xì)胞膜）
IF：觀察熒光信號(hào)是否與目標(biāo)蛋白亞細(xì)胞定位一致，DAPI染色定位細(xì)胞核
關(guān)鍵字： FITC標(biāo)記的增強(qiáng)型藍(lán)色熒光蛋白單克隆抗;EBFP Mouse mAb, FITC;100ul;
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