AP標(biāo)記的小鼠抗人CD44單克隆抗體
原理特點(diǎn)
該抗體為小鼠源單克隆抗體，偶聯(lián)堿性磷酸酶（AP）酶標(biāo)記物，依靠堿性磷酸酶催化底物顯色或發(fā)光的酶促反應(yīng)實(shí)現(xiàn)信號(hào)檢測(cè)?？贵w特異性靶向人CD44黏附分子，CD44廣泛參與細(xì)胞黏附、遷移、增殖及腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程，是腫瘤干細(xì)胞、浸潤(rùn)性腫瘤細(xì)胞的重要標(biāo)志物。AP酶促反應(yīng)背景低、信噪比高、顯色穩(wěn)定，相較于熒光標(biāo)記不受光照淬滅影響，適用于免疫組化顯色、原位檢測(cè)及定量ELISA實(shí)驗(yàn)，可精準(zhǔn)檢測(cè)組織與細(xì)胞中CD44的表達(dá)水平。
英文名稱:CD44 Mouse mAb, AP conjugated
中文名稱:AP標(biāo)記的小鼠抗人CD44單克隆抗體
標(biāo)記物：AP 堿性磷酸酶，酶促顯色標(biāo)記（底物顯色，無(wú)熒光淬滅）
靶蛋白：CD44（透明質(zhì)酸受體，80–95kDa）
宿主：小鼠單克隆
種屬：人
應(yīng)用：ELISA、IHC 顯色、斑點(diǎn)雜交、免疫印跡
蛋白功能：細(xì)胞黏附分子，腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移、干細(xì)胞、淋巴細(xì)胞歸巢標(biāo)志物
特點(diǎn)：酶標(biāo)一抗可直接顯色，無(wú)需二抗；不可凍存，2–8℃避光
靶點(diǎn)背景
1. CD44 是細(xì)胞表面黏附分子，廣泛表達(dá)于多種體細(xì)胞、干細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞表面
2. 介導(dǎo)細(xì)胞與透明質(zhì)酸胞外基質(zhì)黏附，調(diào)控細(xì)胞遷移、侵襲、干細(xì)胞干性維持
3. 腫瘤轉(zhuǎn)移、侵襲研究常用標(biāo)志物，也用于干細(xì)胞分選、免疫細(xì)胞遷移檢測(cè)
樣本處理標(biāo)準(zhǔn)流程
1. 細(xì)胞樣本制備
洗滌：用預(yù)冷PBS輕貼細(xì)胞表面洗滌2-3次，避免用力沖洗導(dǎo)致細(xì)胞脫落。
固定與通透：4℃預(yù)冷的4%多聚甲醛固定15-20分鐘；如需檢測(cè)胞內(nèi)蛋白，用0.1-0.3% Triton X-100室溫通透10-15分鐘。
封閉：用5% BSA或10%胎牛血清室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合。
2. 組織樣本制備
石蠟切片：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、梯度乙醇（100%→95%→80%→70%，各5分鐘）脫蠟水化；檸檬酸緩沖液（pH6.0）熱修復(fù)10-15分鐘，自然冷卻至室溫。
新鮮組織：取材后立即用4%多聚甲醛固定24-48小時(shí)，或-80℃冷凍保存；冷凍切片厚度控制在5-10μm，貼片后自然干燥30分鐘。
3. WB蛋白樣本制備
用RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑）冰上裂解細(xì)胞30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清。
BCA法或Bradford法定量蛋白濃度，調(diào)整至上樣量一致；加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘變性，-20℃保存?zhèn)溆谩?/span>
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關(guān)鍵字： AP標(biāo)記的小鼠抗人CD44單克隆抗體;CD44 Mouse mAb, AP c;100T;
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