RBITC標(biāo)記的小鼠抗人CD4單克隆抗體
原理特點(diǎn)
該抗體為小鼠源單克隆抗體，采用羅丹明B異硫氰酸酯（RBITC）橙色熒光標(biāo)記，熒光光穩(wěn)定性優(yōu)于傳統(tǒng)FITC，不易淬滅?？贵w可特異性靶向結(jié)合人T淋巴細(xì)胞表面的CD4跨膜糖蛋白，CD4是輔助性T細(xì)胞的經(jīng)典表面標(biāo)志物，參與免疫信號(hào)識(shí)別與傳導(dǎo)，該抗體種屬特異性嚴(yán)格，僅識(shí)別人源CD4蛋白，非特異性結(jié)合極低，適用于免疫熒光定位、流式細(xì)胞分選及外周血、組織浸潤T細(xì)胞的亞群分析，是人體免疫分型、自身免疫疾病研究的核心工具抗體。
英文名稱:human CD4 Mouse mAb, RBITC conjugated
中文名稱:RBITC標(biāo)記的小鼠抗人CD4單克隆抗體
英文別名：CD4(L3T4); CD4 antigen(p55); CD4 Antigen; CD4 molecule; CD4 Receptor; CD4+Lymphocyte deficiency, included; CD4mut; L3T4; Leu3; Ly-4; Lymphocyte antigen CD4; MGC165891; p55; T Cell Antigen T4; T cell antigen T4/LEU3; T cell differentiation antigen L3T4; T cell OKT4 deficiency, included; T cell surface antigen T4/Leu 3; T cell surface antigen T4/Leu3; T Cell Surface Glycoprotein CD4; W3/25; W3/25 antigen; T-cell surface glycoprotein CD4 isoform 1 precursor; CD4_HUMAN.
標(biāo)記物：RBITC（羅丹明 B 異硫氰酸酯，橙紅色熒光）
宿主 / 亞型：小鼠 IgG2b κ，經(jīng)典克隆 RPA-T4
特異性：識(shí)別人 CD4 分子（55kDa 跨膜糖蛋白）
種屬：僅人源
驗(yàn)證應(yīng)用：流式細(xì)胞術(shù)（CD4 + 輔助 T 淋巴細(xì)胞分型）、免疫熒光
蛋白功能：輔助 T 細(xì)胞表面標(biāo)志，HIV 受體，免疫分型、免疫缺陷、炎癥研究核心標(biāo)志物
儲(chǔ)存條件：4℃避光，不可冷凍
靶點(diǎn)背景
1. CD4 是輔助性 T 細(xì)胞經(jīng)典表面跨膜糖蛋白，也少量表達(dá)于部分巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞
2. 作為 MHCⅡ 類分子共受體參與 T 細(xì)胞抗原識(shí)別、T 細(xì)胞活化信號(hào)傳導(dǎo)，調(diào)控適應(yīng)性免疫應(yīng)答
3. 流式核心分型指標(biāo)，用于免疫分型、艾滋病免疫評(píng)估、自身免疫病淋巴細(xì)胞亞群分析
實(shí)驗(yàn)操作關(guān)鍵
樣本前處理
細(xì)胞樣本：用PBS緩沖液輕洗2-3次去除培養(yǎng)基殘留，固定（如4%多聚甲醛）后按需進(jìn)行通透處理（0.3% Triton X-100），封閉液（5% BSA或血清）孵育30-60分鐘以降低非特異性結(jié)合。
組織樣本：石蠟切片需先脫蠟水化，根據(jù)抗體類型選擇合適的抗原修復(fù)方法（如檸檬酸鹽緩沖液熱修復(fù)）；新鮮組織需盡快固定或冷凍保存。
抗體孵育
一抗孵育：通常4℃過夜孵育（12-16小時(shí)），或室溫孵育1-2小時(shí)；孵育時(shí)需保證樣本完全被抗體覆蓋，可放置于濕盒中防止液體揮發(fā)。
二抗結(jié)合：選擇與一抗種屬匹配的二抗，室溫避光孵育30-60分鐘；洗板/洗片需充分，通常用PBS或TBST清洗3-5次，每次5分鐘，去除未結(jié)合的二抗。
結(jié)果檢測
熒光檢測：熒光標(biāo)記抗體需避光操作，封片時(shí)使用抗淬滅劑，染色后1小時(shí)內(nèi)完成觀察，或4℃避光保存不超過4小時(shí)。
顯色反應(yīng)：酶標(biāo)抗體需嚴(yán)格控制底物孵育時(shí)間，避免顯色過度或不足；終止反應(yīng)后及時(shí)讀取數(shù)據(jù)，部分顯色產(chǎn)物易褪色需盡快分析。
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關(guān)鍵字： RBITC標(biāo)記的小鼠抗人CD4單克隆抗體;human CD4 Mouse mAb,;100ul;
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