人蛋白二硫化物異構酶A5(PDIA5)重組蛋白用于 PDIA5 氧化還原異構酶活性表征、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白穩(wěn)態(tài)調(diào)控研究、錯誤折疊蛋白降解機制、互作蛋白篩選及抗體制備鑒定。
型號：YS-DB740
產(chǎn)品名稱：人蛋白二硫化物異構酶A5(PDIA5)重組蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Recombinant Protein Disulfide Isomerase A5 (PDIA5)
PDI-A5; PDIR; Protein Disulfide Isomerase-Associated 5; Protein disulfide isomerase-related protein
酶與激酶
物種：Homo sapiens (Human，人)
來源：原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位：：n/a
預測分子量：18.8kDa
實際分子量：18.8kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽：Trp378~Glu506 with
緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性狀：凍干粉
純度：> 95%
等電點：-
應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理：
Western Blot 靶向驗證：PDIA5 特異性抗體識別目標條帶，確認蛋白構建表達正確。
BCA 法精準濃度測定：銅顯色體系準確定量蛋白濃度。
二硫鍵修飾酶活檢測：體外蛋白復性體系，對比底物折疊效率，表征 PDIA5 異構酶催化活性。
內(nèi)毒素比色法定量檢測：適配蛋白折疊機制研究實驗。
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常見實驗場景操作指南：
細胞培養(yǎng)實驗
濃度優(yōu)化：先設置預實驗梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），檢測細胞增殖、分化或信號通路激活情況，確定最優(yōu)工作濃度。
添加時機：細胞接種后24-48小時，待細胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時添加重組蛋白。
更換培養(yǎng)基：若蛋白半衰期較短，需每隔24-48小時更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。
免疫檢測實驗
陽性對照設置：在ELISA或WB實驗中，用已知濃度的重組蛋白制備標準曲線，確保定量準確性。
封閉處理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉，降低非特異性結合。
抗體配對：選擇針對不同表位的捕獲抗體和檢測抗體，避免與重組蛋白的標簽產(chǎn)生交叉反應。
蛋白相互作用實驗
標簽選擇：若使用Pull-down實驗，優(yōu)先選擇GST或His標簽的重組蛋白，便于親和層析分離。
反應條件：在生理緩沖液（如PBS）中進行，溫度控制在4℃，避免蛋白變性。
陰性對照：設置不含目標蛋白的對照組，排除標簽非特異性結合的干擾。
關鍵字： 人蛋白二硫化物異構酶A5;PDIA5;重組蛋白;
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