人肽酶抑制因子16(PI16)重組蛋白用于內源蛋白酶活性拮抗調控、腫瘤侵襲抑制、血管穩(wěn)態(tài)維持體外功能驗證實驗。
型號:YS-DB29
產品名稱:人肽酶抑制因子16(PI16)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Peptidase Inhibitor 16 (PI16)
MSMBBP; CRISP9; PSPBP; Microseminoprotein, Beta-Binding Protein; Protease Inhibitor 16; PSP94-binding protein; Cysteine-rich secretory protein 9
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::分泌
預測分子量:54.5kDa
實際分子量:60kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Leu28~Gly247 with N-terminal His and GST Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:5.3
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理:

蛋白酶拮抗活性檢測:PI16 競爭性結合靶蛋白酶,抑制其底物水解能力,通過殘余蛋白酶活性反向定量 PI16 抑制活性。
特異性抗體免疫定量:PI16 特異性抗體識別重組蛋白,ELISA 比色法測定蛋白表達濃度。
Western Blot 結構驗證:電泳轉膜雜交,特征條帶驗證重組蛋白完整表達,無截短突變。
競爭性結合模式佐證特異性:梯度濃度 PI16 梯度抑制靶酶活性,劑量依賴性抑制曲線證明抑制功能真實有效。
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復溶操作要點:

復溶前準備
工具消毒:移液槍頭、離心管需經過高壓滅菌或一次性無菌處理,避免引入污染。
緩沖液選擇:優(yōu)先使用產品說明書推薦的專用復溶緩沖液,若無推薦可使用:
基礎型:20mM Tris-HCl(pH7.5)+ 150mM NaCl
保護型:在基礎緩沖液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白:膜蛋白需添加去垢劑(如0.05% Triton X-100),酶類需添加輔酶因子
復溶步驟
短暫離心:將凍干蛋白管置于離心機,4℃下8000rpm離心30秒,使底部蛋白集中。
緩慢加液:沿管壁緩慢加入適量緩沖液,避免直接沖擊蛋白沉淀。
溫和溶解:輕輕搖晃離心管或用移液槍緩慢吹吸,禁止渦旋振蕩(易導致蛋白變性)。
靜置溶解:4℃靜置10-30分鐘,難溶蛋白可延長至1小時,期間每隔10分鐘輕輕混勻一次。
關鍵字: 人肽酶抑制因子16;PI16;重組蛋白;
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