本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，微孔板預(yù)先包被人Serpina3g特異性抗體，待測(cè)樣本與梯度標(biāo)準(zhǔn)品中的Serpina3g抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌純化反應(yīng)體系后加入酶標(biāo)記配對(duì)抗體，形成特異性免疫復(fù)合物，底物顯色終止后檢測(cè)吸光度，吸光度值與樣本中Serpina3g含量呈正相關(guān)，可實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G(Serpina3g)ELISA試劑盒
英文名稱：Serpina3g ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E2581
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢出 6.7pg/mL
檢測(cè)范圍：38pg/mL ~ 1550pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：37℃孵育 91min，酶結(jié)合物 61min，避光顯色 24min，總時(shí)長(zhǎng) 3h16min
保存條件：整套試劑 2～8℃冷藏，標(biāo)準(zhǔn)品干粉 - 20℃儲(chǔ)存，復(fù)溶后禁止二次凍融
顯色系統(tǒng)：A、B 顯色液混合后避光反應(yīng)，硫酸終止
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm+650nm 雙波長(zhǎng)校正讀數(shù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：四參數(shù)非線性擬合曲線，6 組稀釋梯度
注意事項(xiàng)：炎癥急性期樣本指標(biāo)大幅升高，超量程必須稀釋復(fù)測(cè)；洗板充分去除非特異性吸附
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
全部試劑室溫平衡 31min，稀釋洗滌緩沖液，逐級(jí)稀釋 Serpina3g 標(biāo)準(zhǔn)品，拆分多余板條冷藏保存。
標(biāo)準(zhǔn)孔加 50μL 梯度標(biāo)準(zhǔn)溶液；待測(cè)孔加 44μL 稀釋液 + 16μL 待測(cè)樣本；空白孔不加液體。
除空白孔外每孔加入 HRP 標(biāo)記抗體工作液 100μL，封板 37℃孵育 67min。
倒掉孔內(nèi)廢液，洗滌液浸泡 40s 甩干，循環(huán)洗板 6 次，吸水紙拍凈殘液。
每孔加入顯色 A、B 液各 50μL，輕微震蕩混勻，37℃避光顯色 19min。
每孔加注終止液 50μL 混勻終止酶促反應(yīng)。
酶標(biāo)儀 450nm 讀取吸光度，定量 Serpina3g 蛋白含量。
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關(guān)鍵字： 人絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝;Serpina3g;ELISA試劑盒;
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