本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測技術(shù)，微孔板預(yù)先包被人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子(SLPI)特異性抗體，待測樣本中的SLPI抗原與固相抗體特異性結(jié)合，后續(xù)結(jié)合酶標(biāo)檢測抗體形成完整夾心免疫復(fù)合物，經(jīng)洗滌、顯色、終止步驟后，通過吸光度檢測定量測定樣本中人SLPI的表達(dá)含量。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA試劑盒

英文名稱：SLPI ELISA Kit
貨號：Y-E2670

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低可測 0.04ng/mL

檢測范圍：0.1ng/mL - 16ng/mL

反應(yīng)時間：樣本孵育 80min，二抗 42min，避光顯色 18min

顯色系統(tǒng)：A+B 雙組份 TMB 混合使用

檢測波長：450nm

特異性：靶向 SLPI 活性結(jié)構(gòu)域，與 α1 - 抗胰蛋白酶交叉反應(yīng)＜2.1%

重復(fù)性：批內(nèi) CV≤5.3%，批間 CV≤7.6%

注意事項：痰液樣本需經(jīng)液化處理后再離心取上清上樣檢測。
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會導(dǎo)致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標(biāo)樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護(hù)

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：

所有試劑室溫回溫 30min，純水稀釋濃縮洗滌液，梯度稀釋 SLPI 標(biāo)準(zhǔn)品，在酶標(biāo)板標(biāo)注各組孔位。

各孔添加待測樣本、標(biāo)準(zhǔn)品、空白稀釋液 50μL，同步加入一步法酶聯(lián)復(fù)合物 100μL，封板嚴(yán)密密封。

37℃恒溫避光孵育 53min，溫度穩(wěn)定無偏差。

撕開封板傾倒廢液，洗滌液浸泡每孔 35s，倒扣拍干，洗板 5 次。

每孔加入顯色 A、B 液各 50μL，輕微震蕩后避光顯色 18min。

每孔加入終止液 50μL，搖晃酶標(biāo)板終止顯色反應(yīng)。

15min 內(nèi) 450nm 讀取數(shù)值，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算 SLPI 抑制因子濃度。
公司正在出售的產(chǎn)品：