小鼠Nei內(nèi)切核酸酶Ⅷ樣蛋白3(NEIL3)重組蛋白適用于氧化性 DNA 損傷修復(fù)機制、基因組維護、腫瘤突變發(fā)生相關(guān)核酸酶功能分析實驗。

型號：YS-DB1766

產(chǎn)品名稱：小鼠Nei內(nèi)切核酸酶Ⅷ樣蛋白3(NEIL3)重組蛋白

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Nei Endonuclease VIII Like Protein 3 (NEIL3)

FPG2; hFPG2; hNEI3; Endonuclease 8-like 3; DNA glycosylase FPG2; DNA glycosylase/AP lyase Neil3; Nei-like protein 3

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：-

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理：

DNA 氧化損傷修復(fù)：NEIL3 切除 DNA 氧化損傷堿基，啟動堿基切除修復(fù)通路。

含損傷堿基寡核苷酸底物電泳遷移率變化，定量核酸內(nèi)切酶切割活性。

WB 驗證重組 NEIL3 表達分子量、純化質(zhì)量。

損傷底物特異性對照，正常 DNA 幾乎無切割活性，僅氧化損傷 DNA 被剪切，驗證酶底物選擇性。
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常見實驗場景操作指南：

細胞培養(yǎng)實驗

濃度優(yōu)化：先設(shè)置預(yù)實驗梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），檢測細胞增殖、分化或信號通路激活情況，確定最優(yōu)工作濃度。

添加時機：細胞接種后24-48小時，待細胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時添加重組蛋白。

更換培養(yǎng)基：若蛋白半衰期較短，需每隔24-48小時更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。

免疫檢測實驗

陽性對照設(shè)置：在ELISA或WB實驗中，用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準曲線，確保定量準確性。

封閉處理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉，降低非特異性結(jié)合。

抗體配對：選擇針對不同表位的捕獲抗體和檢測抗體，避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。

蛋白相互作用實驗

標(biāo)簽選擇：若使用Pull-down實驗，優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白，便于親和層析分離。

反應(yīng)條件：在生理緩沖液（如PBS）中進行，溫度控制在4℃，避免蛋白變性。

陰性對照：設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對照組，排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。