本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測技術(shù)，微孔板固定純化的抗大鼠C4特異性抗體，作為固相捕獲體系，樣本中的C4抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗板后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的C4檢測抗體，形成穩(wěn)定的免疫夾心結(jié)構(gòu)，經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后，檢測各孔吸光度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系，精準(zhǔn)定量大鼠樣本中C4的濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒
英文名稱：C4 ELISA Kit
貨號：Y-E1229
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測濃度≤0.4μg/mL
檢測范圍：0.8μg/mL - 180μg/mL
反應(yīng)時間：全程3.5小時
保存條件：2-8℃低溫保存，試劑密封防污染
有效期：未開封6個月，開封后2個月有效
顯色系統(tǒng)：補(bǔ)體蛋白專屬顯色系統(tǒng)
檢測波長：450nm主波長檢測
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：7梯度標(biāo)準(zhǔn)品，曲線擬合R2≥0.995
特異性：特異性識別大鼠C4補(bǔ)體蛋白，無其他補(bǔ)體交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤6.8%，板間CV≤8.8%
注意事項：樣本無溶血、無脂血；洗板徹底，消除非特異性吸附干擾
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實驗步驟如下：
C4 標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋，試劑盒室溫平衡 26min，標(biāo)記酶標(biāo)板所有微孔組別；
標(biāo)準(zhǔn)孔、待測孔分別加入 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品、大鼠血清，空白孔填充稀釋液；
即刻加入 100μL HRP 標(biāo)記抗 C4 檢測抗體，封板膜密封；
37℃恒溫孵育 57min，一步完成抗原標(biāo)記抗體結(jié)合；
洗滌緩沖液浸泡 40s，吸干，循環(huán)洗板 5 次；
避光加入顯色底物 A、B 各 50μL，37℃避光顯色 13min；
終止液終止反應(yīng)，450nm 讀取 OD 值，換算 C4 濃度。
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關(guān)鍵字： 大鼠補(bǔ)體蛋白4;C4;ELISA試劑盒;
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