本試劑盒采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心原理，預(yù)先將純化的大鼠HDL特異性抗體包被于酶標板微孔內(nèi)，標準品、待測大鼠樣本中的HDL可與包被抗體特異性結(jié)合，再加入酶標記二抗形成抗體-抗原-酶標抗體免疫復(fù)合物，經(jīng)底物顯色液催化顯色，終止反應(yīng)后通過酶標儀測定各孔吸光度值，吸光度數(shù)值與樣本中HDL含量呈正相關(guān)，依據(jù)標準曲線即可精準計算樣本中HDL的濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測濃度≤0.1mmol/L

檢測范圍：0.2mmol/L - 8.0mmol/L

反應(yīng)時間：總反應(yīng)時長90分鐘（溫育60分鐘、洗滌后顯色30分鐘）

保存條件：試劑盒未開封2-8℃冷藏保存，嚴禁冷凍；開封后組分密封2-8℃存放

有效期：未開封有效期6個月，開封后建議1個月內(nèi)用完

顯色系統(tǒng)：TMB單組分顯色液，過氧化物酶催化顯色體系

檢測波長：450nm（主波長），630nm（參比波長）

標準曲線繪制：以標準品濃度為橫坐標，對應(yīng)OD值為縱坐標，繪制四參數(shù)擬合標準曲線，相關(guān)系數(shù)R2≥0.990

特異性：特異性識別大鼠HDL，與大鼠低密度脂蛋白、極低密度脂蛋白無交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)CV≤8%，板間變異系數(shù)CV≤10%

注意事項：樣本需新鮮分離血清，避免溶血、脂血；溫育過程需避光，嚴格控制溫度37℃；顯色終止后15分鐘內(nèi)完成上機檢測
關(guān)鍵注意事項：

本試劑盒僅科研體外檢測，嚴禁臨床診斷使用。

全程避免試劑、板條強光直射，TMB 見光易失效。

移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。

孵育溫度嚴格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。

洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。

終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。

終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。

實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。

不同批次試劑盒組分不可混用。

試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴禁高溫暴曬。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

提前取出試劑盒所有組分室溫平衡 30min，配制 HDL 標準品梯度稀釋液，設(shè)置空白孔、標準品孔、待測樣本孔并做好標記。

每孔直接加入對應(yīng)稀釋完畢的標準品、大鼠血清樣本各 100μL，空白孔加入等量樣本稀釋液，全程避免孔壁掛液。

封板膜密封酶標板，37℃恒溫孵育 60min，期間禁止晃動酶標板，防止抗原抗體結(jié)合體系擾動。

棄去板內(nèi)全部液體，每孔加滿試劑盒配套洗滌液浸泡 30s 后甩干，重復(fù)洗板 5 次，最后一次拍干孔內(nèi)殘留液體。

除空白孔外所有孔加入 HRP 標記 HDL 特異性檢測抗體工作液 100μL，再次封板 37℃避光孵育 30min。

每孔依次加入顯色底物 A 液、B 液各 50μL，輕柔震蕩混勻，37℃避光顯色 15min，肉眼可見標準品孔梯度藍色差異即可終止。

每孔快速加入終止液 50μL 終止顯色反應(yīng)，15min 內(nèi)使用酶標儀在 450nm 波長測定各孔 OD 值，對照標準曲線計算樣本 HDL 濃度。