本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附技術(shù),微孔板包被大鼠BMPR-1A特異性抗體,樣本中的骨成型蛋白受體1A抗原與包被抗體特異性結(jié)合,形成的復(fù)合物可結(jié)合酶標記抗體,經(jīng)顯色反應(yīng)后測定吸光度,數(shù)值與樣本抗原濃度正相關(guān),通過標準曲線完成定量檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1665 |
英文名稱 | BMPR-1A ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測濃度≤18pg/mL
檢測范圍:35pg/mL - 1200pg/mL
反應(yīng)時間:總反應(yīng)時長150分鐘(樣本溫育90分鐘、酶二抗溫育30分鐘、顯色30分鐘)
保存條件:2-8℃避光保存,禁止冷凍,開封后密封防潮
有效期:未開封有效期6個月,開封后1.5個月內(nèi)使用
顯色系統(tǒng):HRP-TMB顯色體系
檢測波長:450nm
標準曲線繪制:四參數(shù)邏輯擬合,曲線相關(guān)性R2≥0.992
特異性:特異性結(jié)合大鼠BMPR-1A,與BMPR-Ⅱ無交叉識別
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤7%,板間CV≤9%
注意事項:細胞樣本需充分裂解、離心取上清;避免雜質(zhì)干擾抗原抗體結(jié)合
試劑盒組成:
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結(jié)合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線,定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標物,提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶(HRP)標記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物,產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng),穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程:
試劑盒室溫回溫 31min,梯度稀釋 BMPR-1A 標準品,設(shè)置酶標板標準孔、大鼠細胞裂解液待測孔、空白孔。
直接加樣:標準孔加標準液 100μL,待測孔加稀釋裂解樣本 100μL,空白孔加稀釋緩沖液。
封板膜封口,37℃孵育 74min,實現(xiàn)受體蛋白與包被抗體結(jié)合。
棄液洗板,洗滌液注滿每孔靜置 31s,循環(huán)洗板 5 次,拍干板內(nèi)殘留液體。
除去空白孔,加入酶標記特異性抗體 100μL,避光 37℃孵育 34min。
加入顯色底物混合液 100μL,避光搖勻,顯色 15min。
終止液終止反應(yīng),450nm 測 OD 值,依據(jù)標準曲線計算 BMPR-1A 濃度。
關(guān)鍵字: 大鼠骨成型蛋白受體1A;BMPR-1A;ELISA試劑盒;
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