本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA原理,將大鼠BMPR-Ⅱ特異性抗體固定于酶標(biāo)板微孔,待測(cè)大鼠樣本中的BMPR-Ⅱ抗原與固相抗體結(jié)合,再加入酶標(biāo)記抗體構(gòu)建免疫夾心復(fù)合物,底物顯色后檢測(cè)吸光度,對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線精準(zhǔn)定量樣本中骨成型蛋白受體Ⅱ的含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1664 |
英文名稱 | BMPR-Ⅱ ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測(cè)濃度≤20pg/mL
檢測(cè)范圍:40pg/mL - 1500pg/mL
反應(yīng)時(shí)間:總反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)160分鐘(樣本溫育100分鐘、酶溫育30分鐘、顯色30分鐘)
保存條件:2-8℃避光冷藏,標(biāo)準(zhǔn)品-20℃凍存,避免反復(fù)凍融
有效期:未開(kāi)封有效期6個(gè)月,開(kāi)封后1個(gè)月內(nèi)用完
顯色系統(tǒng):改良型低背景TMB顯色體系
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,R2≥0.991
特異性:特異性識(shí)別大鼠BMPR-Ⅱ,與BMPR-1A無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤8%,板間CV≤10%
注意事項(xiàng):所有實(shí)驗(yàn)耗材無(wú)蛋白污染;溫育溫度嚴(yán)格控制37℃,誤差≤±1℃
關(guān)鍵注意事項(xiàng):
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書(shū),不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光,避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程:
試劑盒組分室溫平衡 36min,配制 BMPR-Ⅱ 系列梯度標(biāo)準(zhǔn)品,標(biāo)記酶標(biāo)板各類檢測(cè)孔。
一步直接上樣,標(biāo)準(zhǔn)孔加梯度標(biāo)準(zhǔn)品 100μL,待測(cè)孔加大鼠組織裂解上清 100μL,空白孔添加稀釋液。
密閉封板,37℃恒溫孵育 86min,完成抗原捕獲結(jié)合步驟。
傾倒孔內(nèi)廢液,洗滌液浸潤(rùn)每孔 44s 后甩干,連續(xù)洗板 6 次。
檢測(cè)孔加入 HRP 標(biāo)記檢測(cè)抗體 100μL,避光封板,37℃孵育 36min。
依次添加顯色 A、B 液各 50μL,輕微振蕩混勻,37℃避光顯色 20min。
滴加終止液終止反應(yīng),10min 內(nèi) 450nm 讀數(shù),換算樣本 BMPR-Ⅱ 含量。
關(guān)鍵字: 大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ;BMPR-Ⅱ;ELISA試劑盒;
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