雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法，微孔板預(yù)包被抗大鼠 IL-1sRⅡ 特異性捕獲抗體，樣本 IL-1sRⅡ 蛋白吸附于微孔，洗除游離組分后加入酶標(biāo)記抗 IL-1sRⅡ 檢測抗體構(gòu)建夾心結(jié)構(gòu)，TMB 顯色測吸光度，標(biāo)準(zhǔn)曲線定量可溶性受體 Ⅱ 水平。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1487 |
英文名稱 | IL-1sRⅡ ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測靈敏度≤0.25ng/mL
檢測范圍：0.5ng/mL - 60ng/mL
反應(yīng)時間：恒溫孵育120分鐘，酶標(biāo)二抗反應(yīng)60分鐘，避光顯色15分鐘
保存條件：2-8℃避光冷藏保存，嚴(yán)禁冷凍、高溫放置
有效期：未開封有效期6個月
顯色系統(tǒng)：優(yōu)化型TMB顯色系統(tǒng)，背景干擾極低
檢測波長：450nm主波長檢測
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：倍比稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，測定OD值，四參數(shù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，換算IL-1sRⅡ濃度
特異性：專一識別大鼠IL-1sRⅡ，不與IL-1sRⅠ及其他可溶性受體交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤7%，板間CV≤9%
注意事項：1. 嚴(yán)格區(qū)分受體Ⅰ、Ⅱ檢測試劑盒，禁止混用；2. 血清樣本需預(yù)處理去除雜質(zhì)；3. 全程避光顯色；4. 剩余試劑密封妥善保存。
關(guān)鍵注意事項：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實驗操作流程：
試劑平衡：試劑盒室溫復(fù)溫 23min，20× 洗滌液蒸餾水稀釋，酶結(jié)合物混勻。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：IL-1sRⅡ 凍干標(biāo)準(zhǔn)品溶解配置 6 個梯度，現(xiàn)配現(xiàn)用。
樣本上樣：標(biāo)準(zhǔn)孔 50μL 梯度標(biāo)準(zhǔn)液，血漿、免疫細(xì)胞上清 50μL 上樣。
酶結(jié)合物孵育：每孔 50μL HRP 標(biāo)記 sRⅡ 抗體，封膜 37℃避光孵育 61min。
洗板：洗滌液浸泡 32s，拍干，循環(huán)洗板 5 次。
顯色：TMB 底物各 50μL，避光 37℃孵育 15min。
終止檢測：終止液混勻，7min 內(nèi) 450nm 讀數(shù)，換算 IL-1sRⅡ 濃度。
關(guān)鍵字： 大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ;IL-1sRⅡ;ELISA試劑盒;
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