本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測原理，針對大鼠IL-2可溶性受體特異性抗原位點(diǎn)，在微孔板上包被對應(yīng)的捕獲抗體，樣本中的IL-2sR抗原可與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌后加入酶標(biāo)記的特異性檢測抗體，形成穩(wěn)定的免疫夾心復(fù)合物，通過底物酶促顯色反應(yīng)產(chǎn)生特異性顏色變化，顯色強(qiáng)度與樣本中IL-2sR的濃度呈正相關(guān)，終止顯色后檢測吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線即可定量分析大鼠樣本中IL-2sR的含量水平。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒
英文名稱：IL-2sR ELISA Kit
貨號：Y-E1026
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測濃度≤1.5pg/mL
檢測范圍：4pg/mL - 1200pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：總反應(yīng)時(shí)長4.2小時(shí)，37℃恒溫孵育
保存條件：試劑盒2-8℃保存，濃縮洗滌液室溫保存
有效期：未開封有效期6個(gè)月，稀釋后工作液當(dāng)日用完
顯色系統(tǒng)：經(jīng)典TMB-HRP顯色系統(tǒng)，反應(yīng)靈敏、底色低
檢測波長：450nm/630nm雙波長檢測，消除孔底誤差
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：7個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，四參數(shù)Logistic回歸擬合曲線
特異性：特異性結(jié)合大鼠IL-2可溶性受體，不結(jié)合膜型IL-2受體及其他受體蛋白
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤8.5%，板間CV≤10.5%
注意事項(xiàng)：樣本避免溶血、脂血，否則干擾檢測結(jié)果；標(biāo)準(zhǔn)品稀釋精準(zhǔn)，避免濃度偏差；孵育全程密封保濕，防止孔內(nèi)液體蒸發(fā)
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
IL-2sR 凍干標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶梯度稀釋，試劑盒室溫平衡 30min，劃分酶標(biāo)板孔位；
各微孔依次加入 50μL 梯度標(biāo)準(zhǔn)品、大鼠待測組織勻漿上清，空白孔補(bǔ)稀釋液；
每孔添加 100μL 辣根酶標(biāo)記抗 IL-2sR 抗體，密封酶標(biāo)板避免液體揮發(fā)；
37℃避光孵育 60min，一步共孵育形成抗原酶標(biāo)抗體復(fù)合物；
棄液后洗滌緩沖液浸泡微孔 40s，拍干，連續(xù)洗板 5 次；
避光加入顯色底物 A、B 液各 50μL，37℃避光顯色 14min；
終止液終止顯色，混勻后 450nm 測 OD 值，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 IL-2sR 含量。
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關(guān)鍵字： 大鼠白介素2可溶性受體;IL-2sR;ELISA試劑盒;
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