雙抗體夾心 ELISA 原理，微孔板包被抗大鼠 IL-1sRⅠ 捕獲抗體，樣本可溶性 IL-1 受體 Ⅰ 結合固相抗體，洗滌后加入 HRP 標記抗 IL-1sRⅠ 檢測抗體形成夾心復合物，底物顯色讀取 OD 值，對照標準曲線定量可溶性受體 Ⅰ 濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測靈敏度≤0.3ng/mL

檢測范圍：0.6ng/mL - 65ng/mL

反應時間：樣本孵育120分鐘，二抗孵育60分鐘，顯色20分鐘

保存條件：2-8℃避光冷藏，所有試劑密封防潮、禁止冷凍

有效期：原裝試劑盒有效期6個月

顯色系統(tǒng)：TMB底物顯色，酸性終止液終止反應

檢測波長：450nm檢測吸光度

標準曲線繪制：梯度標準品檢測OD值，四參數(shù)擬合繪制標準曲線，計算可溶性受體Ⅰ含量

特異性：特異性識別大鼠IL-1sRⅠ，與IL-1sRⅡ及其他細胞因子受體無交叉反應

重復性：板內(nèi)CV≤8%，板間CV≤10%

注意事項：1. 受體蛋白易降解，樣本需低溫快速處理；2. 試劑嚴格區(qū)分型號，不可混用受體Ⅱ試劑盒試劑；3. 孵育條件恒定；4. 實驗耗材無蛋白污染。
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

試劑平衡：試劑盒室溫放置 26min，洗滌液 1:20 稀釋，全程避光。

標準品制備：IL-1sRⅠ 凍干標準品梯度稀釋 7 個梯度，雙復孔消除誤差。

加樣：標準孔 50μL 標準品，血清、細胞培養(yǎng)上清 50μL 加入檢測孔。

酶標抗體孵育：每孔 50μL HRP-sRⅠ 抗體，密封 37℃避光孵育 72min。

洗板：洗滌液浸泡 42s，拍干，洗板 6 次。

顯色：底物 A、B 各 50μL，避光 37℃顯色 22min。

終止讀數(shù)：終止液混勻，10min 內(nèi) 450nm 測 OD 值，計算 IL-1sRⅠ 含量。