本試劑盒采用高靈敏雙抗體夾心ELISA法，酶標(biāo)板微孔固定大鼠OPN特異性抗體，樣本中的骨橋素抗原與包被抗體特異性結(jié)合，形成的免疫復(fù)合物結(jié)合酶標(biāo)抗體后催化底物顯色，吸光度與樣本OPN濃度正相關(guān)，可精準(zhǔn)測(cè)定大鼠樣本中骨橋素的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1322 |
英文名稱 | OPN ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)濃度≤12pg/mL
檢測(cè)范圍：25pg/mL - 900pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：總反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)130分鐘（樣本溫育70分鐘、酶二抗溫育30分鐘、顯色30分鐘）
保存條件：2-8℃避光保存，標(biāo)準(zhǔn)品-20℃分裝凍存
有效期：未開封有效期6個(gè)月，開封后1個(gè)月內(nèi)使用
顯色系統(tǒng)：TMB高靈敏度顯色體系
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm/630nm雙波長(zhǎng)校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：四參數(shù)邏輯擬合，R2≥0.990
特異性：特異性識(shí)別大鼠OPN蛋白，與骨鈣素、骨粘連蛋白無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤7%，板間CV≤9%
注意事項(xiàng)：組織樣本充分勻漿離心，去除雜質(zhì)；樣本無反復(fù)凍融，保證蛋白完整性
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫平衡 30min，復(fù)溶 OPN 標(biāo)準(zhǔn)品配制 6 個(gè)梯度濃度，標(biāo)記酶標(biāo)板各孔用途。
直接加樣：標(biāo)準(zhǔn)孔加梯度標(biāo)準(zhǔn)品 100μL，待測(cè)孔加大鼠腎臟組織上清 100μL，空白孔加稀釋液。
密封酶標(biāo)板，37℃孵育 80min，完成 OPN 抗原與包被抗體結(jié)合。
棄液后洗滌液注滿每孔靜置 33s，洗板 5 次，倒扣拍干孔底殘留洗液。
除去空白孔，加入 HRP 標(biāo)記檢測(cè)抗體 100μL，避光 37℃孵育 32min。
加入顯色 AB 混合液 100μL，輕柔震蕩，避光顯色 17min。
終止液終止酶促反應(yīng)，450nm 測(cè)定吸光值，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線得到 OPN 含量。
關(guān)鍵字： 大鼠骨橋素;OPN;ELISA試劑盒;
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