本試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心ELISA原理,預(yù)先將大鼠sCD30L捕獲抗體包被于酶標(biāo)板微孔,加入待測(cè)樣本后,樣本中的sCD30L抗原與固相抗體特異性結(jié)合,洗板后加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體完成夾心結(jié)合,經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度,吸光度高低與樣本sCD30L含量正相關(guān),結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線精準(zhǔn)定量目標(biāo)蛋白濃度。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:大鼠可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA試劑盒
英文名稱:sCD30L ELISA Kit
貨號(hào):Y-E1520
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低檢測(cè)靈敏度≤0.05ng/mL
檢測(cè)范圍:0.1ng/mL - 12ng/mL
反應(yīng)時(shí)間:37℃恒溫總反應(yīng)140分鐘
保存條件:2-8℃避光冷藏,開封試劑1個(gè)月內(nèi)用完
有效期:原裝有效期12個(gè)月
顯色系統(tǒng):?jiǎn)谓M分TMB顯色液,顯色穩(wěn)定
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm+570nm雙波長(zhǎng)檢測(cè)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:五梯度標(biāo)準(zhǔn)濃度,四參數(shù)擬合
特異性:特異性結(jié)合大鼠sCD30L配體蛋白,無(wú)同源配體交叉反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤6.8%,板間CV≤8%
注意事項(xiàng):配體蛋白活性易流失,樣本采集后低溫保存;孵育溫度精準(zhǔn)恒定
關(guān)鍵注意事項(xiàng):

實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下:

試劑盒室溫放置 30min,按說明書稀釋洗滌濃縮液。
酶標(biāo)板區(qū)分孔位功能,空白孔不加待測(cè)物,標(biāo)準(zhǔn)品、陰陽(yáng)性對(duì)照、稀釋樣本搭配酶標(biāo)記物加孔。
覆膜密封,37℃溫箱孵育 60min。
洗板 5 次,浸泡 30s / 次,棄液拍干微孔。
顯色液避光顯色 15min。
加入終止液終止酶促反應(yīng)。
450nm 讀取 OD 值,計(jì)算 sCD30L 濃度。
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