本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法原理，酶標(biāo)板包被大鼠sP-selectin捕獲抗體，待測(cè)樣本中的sP-selectin抗原可特異性結(jié)合固相抗體，洗板去除游離雜質(zhì)后，加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體構(gòu)建夾心免疫復(fù)合物，經(jīng)顯色、終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度，吸光度值與樣本sP-selectin含量正相關(guān)，依托標(biāo)準(zhǔn)曲線精準(zhǔn)定量目標(biāo)蛋白水平。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒
英文名稱：sP-selectin ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1419
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)濃度小于1.0 pg/mL
檢測(cè)范圍：4 pg/mL - 150 pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：全程120分鐘（樣本孵育60min、酶標(biāo)孵育30min、顯色30min）
保存條件：2-8℃避光干燥保存，不可冷凍，冷凍會(huì)導(dǎo)致抗體失活
有效期：未開封12個(gè)月，開封后試劑4℃保存，20天內(nèi)使用完畢
顯色系統(tǒng)：高靈敏度TMB顯色體系，顯色均勻、背景值低
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm，推薦630nm參比校準(zhǔn)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：六梯度標(biāo)準(zhǔn)品擬合，四參數(shù)曲線模型，R2≥0.990
特異性：僅特異性結(jié)合大鼠sP-selectin，與其他粘附分子、選擇素家族蛋白無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤7.5%，板間CV≤9.5%
注意事項(xiàng)：血小板激活會(huì)影響樣本檢測(cè)結(jié)果，樣本采集后需快速分離上清；孵育溫度恒定37℃，溫差過(guò)大影響反應(yīng)效率；終止液具有腐蝕性，操作需佩戴防護(hù)手套。
儲(chǔ)存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
全部試劑室溫回溫 28min，稀釋洗滌液，配制酶工作液。
酶標(biāo)板設(shè)置空白、標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)控、樣本孔，依次加入稀釋樣品與酶標(biāo)記工作液。
密封板體，37℃孵育 63min。
洗板 5 次，浸泡 28s / 次，濾紙拍干廢液。
底物避光 37℃反應(yīng) 14min。
終止液滴入震蕩混勻終止反應(yīng)。
450nm 檢測(cè)吸光度，定量 sP-selectin。
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關(guān)鍵字： 大鼠可溶性P選擇素;sP-selectin;ELISA試劑盒;
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