本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理，預(yù)先將大鼠GM-CSF特異性捕獲抗體包被于酶標(biāo)板微孔，待測樣本中的GM-CSF抗原可與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除游離雜質(zhì)后，加入HRP標(biāo)記檢測抗體形成夾心復(fù)合物，底物顯色終止后測定吸光度，吸光度數(shù)值與樣本GM-CSF含量正相關(guān)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線完成定量檢測。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒
英文名稱：GM-CSF ELISA Kit
貨號：Y-E1659
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測濃度小于0.9 pg/mL
檢測范圍：2.5 pg/mL - 100 pg/mL
反應(yīng)時間：全程110分鐘（樣本孵育50min、酶標(biāo)孵育30min、顯色30min）
保存條件：2-8℃密封避光干燥保存，禁止冷凍
有效期：12個月
顯色系統(tǒng)：HRP-TMB穩(wěn)定顯色體系，讀數(shù)誤差小、重復(fù)性高
檢測波長：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：七點梯度擬合，R2≥0.992
特異性：專一結(jié)合大鼠GM-CSF，與各類集落刺激因子無交叉識別
重復(fù)性：板內(nèi)CV＜7%，板間CV＜9%
注意事項：樣本采集后盡快檢測，細胞因子易降解；洗板均勻徹底，避免孔間交叉污染；終止后及時上機讀數(shù)。
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實驗步驟如下：
試劑盒室溫平衡 32min，按說明書配比稀釋洗滌液。
分組標(biāo)記微孔，空白孔添加稀釋緩沖液，標(biāo)準(zhǔn)品、陰陽性對照、待測稀釋樣本與酶結(jié)合物同步加孔。
封板后 37℃孵育 65min。
洗板 5 次，浸泡 31s 每次，吸干板內(nèi)多余液體。
顯色 AB 液避光顯色 16min。
終止液加入混勻終止酶促反應(yīng)。
450nm 酶標(biāo)儀測值，測算 GM-CSF 含量。
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關(guān)鍵字： 大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子;GM-CSF;ELISA試劑盒;
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