本試劑盒采用雙抗體夾心酶免疫檢測(cè)原理,酶標(biāo)板預(yù)先包被大鼠M-CSF特異性捕獲抗體,可特異性識(shí)別并結(jié)合樣本中的巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗原。孵育結(jié)合后洗板除雜,加入HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體構(gòu)建免疫夾心結(jié)構(gòu),底物顯色后信號(hào)強(qiáng)度與M-CSF含量呈正相關(guān)。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度并擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,可精準(zhǔn)定量大鼠樣本中M-CSF的表達(dá)水平。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1502 |
英文名稱 | M-CSF ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測(cè)靈敏度0.1pg/mL,可精準(zhǔn)檢測(cè)免疫相關(guān)微量M-CSF細(xì)胞因子。
檢測(cè)范圍:0.2pg/mL - 25pg/mL,適配大鼠免疫組織、血清、巨噬細(xì)胞上清樣本。
反應(yīng)時(shí)間:全流程95分鐘,樣本溫育65分鐘,顯色20分鐘。
保存條件:2-8℃避光冷藏保存,洗滌液室溫密封存放。
有效期:原裝未拆封有效期6個(gè)月,開(kāi)封后30天內(nèi)使用完畢。
顯色系統(tǒng):TMB酶促顯色系統(tǒng),反應(yīng)穩(wěn)定,顏色梯度均勻。
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)波長(zhǎng)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:四參數(shù)擬合曲線,R2≥0.990。
特異性:特異性識(shí)別大鼠M-CSF,與GM-CSF、G-CSF無(wú)交叉反應(yīng)。
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤8%,板間CV≤10%,符合科研標(biāo)準(zhǔn)。
注意事項(xiàng):免疫樣本需無(wú)菌處理,避免污染;樣本避免反復(fù)凍融;溫育溫度嚴(yán)格控制37℃。
儲(chǔ)存與有效期:
未開(kāi)封整套試劑盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷凍;有效期 12 個(gè)月。
開(kāi)封后保存
剩余酶標(biāo)板條:自封袋密封,內(nèi)置干燥劑 2~8℃避光;1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
濃縮洗滌液:2~30℃常溫保存,結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品:分裝 - 20℃凍存,避免反復(fù)凍融,1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程:
試劑盒常溫靜置 34min,稀釋洗滌濃縮液,倍比稀釋 M-CSF 標(biāo)準(zhǔn)品,取用酶標(biāo)板條。
標(biāo)品孔加梯度標(biāo)品 50μL,細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本孔上樣 50μL 稀釋樣本,空白孔添加稀釋緩沖液。
全孔加入酶結(jié)合抗體液 100μL,密封酶標(biāo)板,37℃孵育 70min。
洗板 5 次,浸泡 34s 每回,甩干液體拍干板孔殘留液體。
避光添加顯色 A、B 底物各 50μL,37℃避光顯色 19min。
滴入終止液 50μL 終止反應(yīng),震蕩混勻。
450nm 讀取 OD 值,計(jì)算 M-CSF 含量。
關(guān)鍵字: 大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子;M-CSF;ELISA試劑盒;
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