本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，固相載體包被大鼠PL-A2特異性捕獲抗體，樣本及標(biāo)準(zhǔn)品中的PL-A2抗原可與抗體特異性結(jié)合，洗去游離雜質(zhì)后，加入酶標(biāo)二抗形成夾心復(fù)合物，酶催化底物生成有色產(chǎn)物，吸光度值與樣本中PL-A2含量呈正相關(guān)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出大鼠樣本中PL-A2的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒
英文名稱：PL-A2 ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1361
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)濃度≤0.1ng/mL
檢測(cè)范圍：0.3ng/mL - 9ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：總反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)110min
保存條件：2-8℃避光保存，酶結(jié)合物單獨(dú)避光存放
有效期：未開封有效期6個(gè)月
顯色系統(tǒng)：經(jīng)典TMB顯色體系，顯色靈敏、底色低
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm單波長(zhǎng)檢測(cè)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：5-6個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，根據(jù)OD值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本濃度
特異性：特異性結(jié)合大鼠PL-A2，與磷脂酶家族其他成員無(wú)明顯交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV＜8%，板間CV＜10%
注意事項(xiàng)：樣本采集后及時(shí)檢測(cè)，避免蛋白活性流失；洗滌充分，去除殘留雜質(zhì)；避免試劑交叉污染
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無(wú)酶、無(wú)熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過(guò)久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
微孔板每孔上樣標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 / 待測(cè)血清樣本 48μL，空白孔添加等量緩沖液，標(biāo)記孔號(hào)。
每孔加入 HRP 酶標(biāo)記抗體 102μL，覆膜密封，37℃孵育 55min。
傾倒廢液，洗滌液注滿微孔浸泡 22s，拍干水分，連續(xù)洗板 5 次。
避光添加顯色液 A、B 各 50μL，輕微晃動(dòng)微孔板，暗處顯色 14min。
每孔滴加終止液 50μL，終止酶促顯色反應(yīng)，混勻體系。
清理板底污漬，酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定 OD 值并保存數(shù)據(jù)。
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，換算樣本 PL-A2 濃度，復(fù)孔偏差大于 15% 該孔數(shù)據(jù)作廢重測(cè)。
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關(guān)鍵字： 大鼠磷脂酶A2;PL-A2;ELISA試劑盒;
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