本試劑盒采用特異性雙抗體夾心ELISA技術，酶標板固相包被可特異性結合大鼠甲狀腺素抗體（TAb）的抗原蛋白，孵育時樣本中的TAb可與固相抗原特異性結合。洗滌去除未結合物質后，加入HRP標記的特異性檢測抗體，形成穩(wěn)定免疫復合物，經(jīng)底物顯色、終止反應后檢測吸光度。依據(jù)標準曲線換算，可精準定量大鼠樣本中TAb的表達水平。
產品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測濃度≤10IU/mL

檢測范圍：20IU/mL - 800IU/mL

反應時間：總反應時長120min（抗原抗體結合90min、顯色30min）

保存條件：2-8℃冷藏避光，抗體試劑密封存放防失活

有效期：12個月（未開封）

顯色系統(tǒng)：免疫檢測專用TMB顯色系統(tǒng)

檢測波長：450nm

標準曲線繪制：梯度抗體標準品檢測，四參數(shù)擬合定量曲線

特異性：特異性結合大鼠甲狀腺素抗體，無其他自身抗體交叉反應

重復性：板內CV≤7%，板間CV≤9%

注意事項：樣本避免污染，防止非特異性抗體干擾檢測結果
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。

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實驗操作流程：

試劑盒室溫平衡 35min，配制洗滌液，梯度稀釋 TAb 標準品，取出酶標板條備用。

標品孔加不同濃度標準品 50μL，樣本孔上樣預處理樣本 50μL，空白孔添加稀釋緩沖液。

每孔加入酶標記抗體工作液 100μL，覆膜封板，37℃孵育 73min。

洗板 5 次，洗液浸泡 35s 每輪，棄液后吸水紙拍干微孔。

避光加顯色 A、B 液各 50μL，37℃避光顯色 20min。

滴入終止液 50μL 終止酶促顯色。

450nm 讀取 OD 值，曲線計算 TAb 抗體含量。