本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測技術(shù)，酶標(biāo)板固相包被大鼠降鈣素（CT）特異性捕獲抗體，用于特異性結(jié)合待測樣本中的CT抗原。經(jīng)過孵育結(jié)合、洗板凈化、酶標(biāo)抗體結(jié)合、底物顯色反應(yīng)后，體系吸光度值與樣本中降鈣素含量呈正相關(guān)。通過擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，可精準(zhǔn)定量檢測大鼠血清、組織樣本中CT的濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測濃度≤1.0pg/mL

檢測范圍：2pg/mL - 150pg/mL

反應(yīng)時間：總反應(yīng)時長115min（孵育85min、顯色30min）

保存條件：2-8℃避光保存，多肽激素試劑密封防潮

有效期：12個月（未開封）

顯色系統(tǒng)：低背景高靈敏TMB顯色體系

檢測波長：450nm

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：7點(diǎn)梯度標(biāo)準(zhǔn)品檢測，四參數(shù)擬合精準(zhǔn)曲線

特異性：特異性結(jié)合大鼠降鈣素，與其他鈣調(diào)節(jié)激素?zé)o交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)CV≤6%，板間CV≤8%

注意事項(xiàng)：樣本采集后低溫保存，降鈣素穩(wěn)定性差，易降解
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。

取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記

酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

試劑盒室溫平衡 32min，配比洗滌工作液，稀釋 CT 標(biāo)準(zhǔn)品，拆分酶標(biāo)板所需條帶。

標(biāo)品孔加入梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，大鼠血清樣本孔加稀釋后樣本 50μL，空白孔加稀釋緩沖液。

每孔添加酶標(biāo)記抗體 100μL，封板膜封閉，37℃孵育 65min。

洗板 5 次，浸泡 32s 每輪，棄凈液體后吸水紙拍干板條。

避光加入顯色 A、B 液各 50μL，37℃避光顯色 16min。

滴入終止液 50μL 混勻終止反應(yīng)。

酶標(biāo)儀 450nm 檢測，得出降鈣素 CT 濃度。