本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理，固相酶標(biāo)板包被純化的大鼠膠原酶I特異性抗體，能夠特異性識別并結(jié)合樣本中的膠原酶I抗原分子。加入標(biāo)準(zhǔn)品與待測樣本孵育反應(yīng)，充分結(jié)合后洗板除雜，加入HRP標(biāo)記的檢測抗體形成免疫夾心復(fù)合物。經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后檢測吸光度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)定量大鼠樣本中膠原酶I的濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1141 |
英文名稱 | Rat Collagenase I ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測濃度≤0.09ng/mL
檢測范圍：0.18ng/mL - 10ng/mL
反應(yīng)時間：總反應(yīng)時長125min（酶孵育95min、顯色30min）
保存條件：2-8℃冷藏避光，膠原酶試劑輕拿輕放，避免失活
有效期：原裝未開封12個月
顯色系統(tǒng)：膠原酶檢測專用TMB顯色體系
檢測波長：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：6點梯度標(biāo)準(zhǔn)品檢測，四參數(shù)擬合定量曲線
特異性：特異性結(jié)合大鼠I型膠原酶，與II型膠原酶無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤8%，板間CV≤10%
注意事項：組織樣本需充分勻漿、離心，去除雜質(zhì)干擾
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實驗操作流程：
試劑盒室溫靜置 34min，配制洗滌液，復(fù)溶 Collagenase I 凍干標(biāo)準(zhǔn)品并梯度稀釋，取用酶標(biāo)板條。
空白孔加稀釋液，標(biāo)準(zhǔn)孔依次添加梯度標(biāo)品 50μL，樣本孔加入稀釋后組織樣本 50μL。
每孔加入酶標(biāo)記工作液 100μL，封板 37℃孵育 71min。
洗板 5 次，浸泡 34s 每回，棄液后充分拍干板孔殘留液體。
避光加入顯色 A、B 液各 50μL，37℃避光顯色 19min。
終止液 50μL 滴加混勻終止反應(yīng)。
450nm 讀取 OD 值，定量膠原酶 I 濃度。
關(guān)鍵字： 大鼠膠原酶I;Collagenase I;ELISA試劑盒;
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