本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，酶標(biāo)板微孔固定抗大鼠EL特異性抗體，加入待測(cè)大鼠樣本和梯度標(biāo)準(zhǔn)品，樣本中的EL抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌后加入酶標(biāo)檢測(cè)抗體形成夾心結(jié)構(gòu)，顯色終止后檢測(cè)吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)定量測(cè)定EL含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒
英文名稱(chēng)：EL ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1377
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)濃度小于0.05U/L，能夠精準(zhǔn)檢測(cè)大鼠樣本中低豐度內(nèi)皮脂肪酶活性。
檢測(cè)范圍：0.1U/L - 20U/L，適配大鼠血清、血漿、組織裂解液中EL活性常規(guī)檢測(cè)需求。
反應(yīng)時(shí)間：全程實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)100分鐘，樣本結(jié)合孵育35分鐘，酶結(jié)合物孵育30分鐘，顯色20分鐘，終止平衡15分鐘。
保存條件：全套試劑2-8℃避光冷藏保存，濃縮洗滌液低溫可能結(jié)晶，使用前溫水溶解搖勻即可，禁止高溫存放。
有效期：原裝未拆封試劑盒有效期6個(gè)月，開(kāi)封后試劑1個(gè)月內(nèi)用完，避免活性衰減。
顯色系統(tǒng)：TMB特異性顯色體系，HRP酶促顯色反應(yīng)，顯色均勻，梯度區(qū)分度高，無(wú)非特異性顯色。
檢測(cè)波長(zhǎng)：檢測(cè)主波長(zhǎng)450nm，輔助校正波長(zhǎng)600nm，有效消除微孔板背景干擾。
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制：基于梯度標(biāo)準(zhǔn)品OD值擬合四參數(shù)曲線(xiàn)，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)R2≥0.992，濃度計(jì)算精準(zhǔn)度高。
特異性：專(zhuān)一識(shí)別大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)，與脂蛋白脂酶、肝脂肪酶等同類(lèi)脂肪酶無(wú)交叉反應(yīng)，特異性極強(qiáng)。
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤7%，板間CV≤9%，多次重復(fù)檢測(cè)數(shù)據(jù)偏差小，實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性?xún)?yōu)異。
注意事項(xiàng)：血漿樣本需選用EDTA抗凝劑，避免肝素抗凝影響酶活性；孵育過(guò)程嚴(yán)格密封，防止孔內(nèi)液體蒸發(fā)；試劑搖勻操作輕柔，避免產(chǎn)生氣泡。
儲(chǔ)存與有效期：
未開(kāi)封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開(kāi)封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
微孔板分孔上樣標(biāo)準(zhǔn)品溶液 53μL，血管組織勻漿樣本 53μL，標(biāo)注孔號(hào)。
加入 HRP 酶標(biāo)記抗體液 97μL，覆膜封板，37℃孵育 57min。
傾倒廢液，洗滌液浸泡 28s，拍干水分，洗板 4 次。
避光滴加顯色 AB 液各 50μL，輕微震動(dòng)板體，顯色 19min。
終止液 50μL 每孔添加，終止顯色并混勻液體。
清潔板底后酶標(biāo)儀 450nm 檢測(cè)吸光度。
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算 EL 酶含量，分析脂代謝內(nèi)皮酶活性相關(guān)蛋白。
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關(guān)鍵字： 大鼠內(nèi)皮脂肪酶;EL;ELISA試劑盒;
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