本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理，酶標板微孔固定抗大鼠FⅫ特異性抗體，加入待測大鼠樣本和梯度標準品，樣本中的FⅫ抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌后加入酶標檢測抗體形成夾心結(jié)構(gòu)，顯色終止后檢測吸光度，結(jié)合標準曲線定量測定FⅫ含量。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒

英文名稱：FⅫ ELISA Kit
貨號：Y-E1104

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測濃度≤0.09ng/mL，可精準檢測大鼠血漿中凝血因子Ⅻ微量含量。

檢測范圍：0.1ng/mL - 21ng/mL，適配大鼠內(nèi)源性凝血啟動相關樣本檢測。

反應時間：總實驗時長95分鐘，樣本孵育30min、酶孵育30min、顯色20min、終止15min。

保存條件：2-8℃避光冷藏保存，所有試劑密封存放，禁止冷凍。

有效期：原裝試劑盒有效期6個月，恒溫存放無活性損失。

顯色系統(tǒng)：穩(wěn)定TMB顯色體系，顯色均勻，無假性顯色干擾結(jié)果。

檢測波長：450nm檢測波長，600nm校正波長，提升檢測準確性。

標準曲線繪制：四參數(shù)擬合標準曲線，R2≥0.991，定量精準可靠。

特異性：特異性識別大鼠凝血因子Ⅻ，與其他凝血因子無交叉反應。

重復性：板內(nèi)CV≤7%，板間CV≤9%，實驗重復性良好。

注意事項：避免樣本劇烈震蕩，防止因子蛋白結(jié)構(gòu)破壞；嚴格遵循孵育時長要求。
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。
實驗步驟如下：

預包被板每孔加入標準品稀釋液 53μL，大鼠血漿樣本 53μL，標記分組與孔號。

加入 HRP 酶標記抗體 97μL，覆膜封板，37℃孵育 54min。

廢液傾倒，洗滌液浸泡 25s，拍干，洗板 4 次。

避光滴加顯色 AB 液各 50μL，輕微震動微孔板，顯色 16min。

終止液 50μL 每孔滴加，終止顯色并混勻液體。

清潔板底污漬后酶標儀 450nm 檢測吸光度。

擬合標準曲線計算 FⅫ 含量，評估內(nèi)源性凝血通路啟動因子。
公司正在出售的產(chǎn)品：