本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA技術(shù)原理，固相載體包被大鼠CIAP特異性捕獲抗體，待測(cè)大鼠樣本中的CIAP抗原與抗體特異性結(jié)合，洗去未結(jié)合雜質(zhì)后加入酶標(biāo)二抗形成免疫復(fù)合物，底物顯色深淺與CIAP含量呈正相關(guān)，通過吸光度檢測(cè)及標(biāo)準(zhǔn)曲線換算，精準(zhǔn)定量樣本中CIAP濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒
英文名稱：CIAP ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1234
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)濃度≤0.1U/L，可精準(zhǔn)檢測(cè)大鼠組織、體液中CIAP微量酶活性。
檢測(cè)范圍：0.2U/L - 35U/L，適配大鼠骨骼、腸道功能相關(guān)樣本CIAP檢測(cè)。
反應(yīng)時(shí)間：總實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)105分鐘，樣本孵育35min、酶孵育35min、顯色20min、終止15min。
保存條件：2-8℃避光冷藏保存，酶試劑嚴(yán)禁高溫、冷凍存放，防止活性喪失。
有效期：原裝試劑盒有效期6個(gè)月，恒溫恒濕存放穩(wěn)定。
顯色系統(tǒng)：堿性磷酸酶專用優(yōu)化TMB顯色體系，酶促反應(yīng)匹配度高，顯色穩(wěn)定。
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm檢測(cè)波長(zhǎng)，600nm校正波長(zhǎng)，有效降低背景干擾。
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，R2≥0.990，滿足酶活性精準(zhǔn)定量需求。
特異性：特異性識(shí)別大鼠CIAP，與酸性磷酸酶、其他堿性磷酸酶同工酶無交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤8%，板間CV≤10%，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性達(dá)標(biāo)。
注意事項(xiàng)：樣本處理全程低溫，防止CIAP酶活性降解；顯色反應(yīng)嚴(yán)格控溫控時(shí)，保證結(jié)果穩(wěn)定。
儲(chǔ)存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
微孔板每孔加入梯度稀釋 CIAP 標(biāo)準(zhǔn)品 52μL，待測(cè)酶液樣本 52μL，全程避光防酶失活。
直接加入酶標(biāo)記工作液 99μL，封板恒溫孵育，37℃反應(yīng) 60min。
廢液排空，洗滌液浸泡 33s，拍干殘留液體，洗板 4 次。
避光添加顯色 AB 液各 50μL，混勻室溫顯色 17min。
每孔滴入終止液 50μL 終止顯色，晃動(dòng)微孔板混勻孔內(nèi)液體。
酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定吸光度數(shù)值，快速完成檢測(cè)防止底物降解。
依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 CIAP 蛋白含量，定量堿性磷酸酶表達(dá)水平。
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關(guān)鍵字： 大鼠牛小腸堿性磷酸酶;CIAP;ELISA試劑盒;
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