本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理,酶標板微孔固定抗大鼠MIP-1β/CCL4特異性捕獲抗體,可特異性結(jié)合待測樣本中的巨噬細胞炎癥蛋白1β抗原。孵育反應后洗板除雜,加入HRP標記的檢測抗體形成穩(wěn)定免疫復合物,底物顯色后終止反應。檢測吸光度并對照標準曲線,可精準定量大鼠樣本中MIP-1β/CCL4的濃度。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1674 |
英文名稱 | MIP-1β ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測靈敏度0.1pg/mL,精準檢測炎癥微量蛋白。
檢測范圍:0.2pg/mL - 24pg/mL,適配大鼠炎癥模型血清、組織、免疫細胞上清。
反應時間:全流程95分鐘,溫育65分鐘,顯色20分鐘。
保存條件:2-8℃避光冷藏,洗滌液室溫密封保存。
有效期:未開封有效期6個月,開封后30天內(nèi)使用。
顯色系統(tǒng):TMB酶促顯色,梯度清晰、穩(wěn)定性高。
檢測波長:450nm標準檢測波長。
標準曲線繪制:四參數(shù)擬合,R2≥0.990。
特異性:特異性結(jié)合大鼠CCL4,與MIP-1α無交叉反應。
重復性:板內(nèi)CV≤8%,板間CV≤10%。
注意事項:炎癥樣本需低溫離心;洗板充分,避免殘留抗體影響結(jié)果。
儲存與有效期:
未開封整套試劑盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷凍;有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標板條:自封袋密封,內(nèi)置干燥劑 2~8℃避光;1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
濃縮洗滌液:2~30℃常溫保存,結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復溶后標準品:分裝 - 20℃凍存,避免反復凍融,1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實驗操作流程:
所有組分室溫平衡 28min,配制洗滌工作液,梯度稀釋 MIP-1β/CCL4 標準品,裁剪酶標板條。
標品孔加梯度標準品 50μL,大鼠血清樣本孔上樣 50μL 稀釋樣本,空白孔添加稀釋緩沖液。
全部孔位添加酶標記工作液 100μL,密封酶標板,37℃孵育 56min。
洗板 4 次,浸泡 28s 每回,甩干液體拍干微孔。
避光添加顯色 A、B 底物各 50μL,37℃避光顯色 12min。
滴加終止液 50μL 混勻終止反應。
450nm 檢測吸光值,計算 MIP-1β/CCL4 濃度。
關鍵字: 大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1β;MIP-1β/CCL4;ELISA試劑盒;
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