本試劑盒以雙抗體夾心ELISA技術為核心檢測原理，在酶標板微孔內包被純化的大鼠LPL特異性抗體。檢測孵育階段，待測樣本和標準品中的大鼠LPL抗原可特異性吸附于固相抗體上，洗板去除未結合的雜質蛋白與液體后，加入辣根過氧化物酶標記的LPL檢測抗體，完成特異性二次結合。經底物TMB顯色、終止液終止反應后，微孔內溶液吸光度值與樣本中LPL含量呈正相關，通過檢測吸光度并擬合標準曲線，可精準定量大鼠樣本中脂蛋白脂酶的濃度。
產品參數：

?靈敏度：最低檢測濃度≤0.2ng/mL

檢測范圍：0.5ng/mL - 100ng/mL

反應時間：總反應130分鐘（樣本孵育70min、酶孵育30min、顯色30min）

保存條件：2-8℃避光保存，禁止冷凍，開封試劑1個月內用完

有效期：12個月

檢測波長：450nm

標準曲線繪制：以標準品濃度梯度對應OD值擬合標準曲線，R2≥0.991

注意事項：樣本采集后需快速分離上清，避免酶活性降解，實驗全程避免高溫環(huán)境
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現配現用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。

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實驗操作流程：

1. 試劑盒全部試劑室溫平衡 28min，配制洗滌工作液，待測組織勻漿上清 12000rpm 離心 10min 取上清備用，酶標板拆取所需條數。

2. 標準品孔依次加入梯度標準品 50μL，樣本孔加入 50μL 上清待測液，空白孔添加稀釋緩沖液 50μL。

3. 各孔加入酶結合抗體工作液 100μL，封板膜密封，37℃恒溫孵育 65min，中途無需開蓋。

4. 移除封板膜，傾倒廢液，洗滌液加滿每孔，浸泡 30s 甩干，重復洗板 5 次，板孔倒置拍干水分。

5. 避光添加顯色底物 A、B 各 50μL，輕微震蕩，37℃避光顯色 16min。

6. 加入終止液 50μL / 孔，混勻終止反應。

7. 酶標儀 450nm 讀數，繪制標準曲線計算脂蛋白脂酶含量。