本試劑盒基于競爭ELISA檢測原理研發(fā)，微孔板預(yù)先包被8-異構(gòu)前列腺素F2α固相抗原，檢測體系中加入梯度標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本及特異性抗體，樣本中的8-epi-PGF2α與固相抗原競爭結(jié)合抗體位點，孵育平衡后洗滌除去游離反應(yīng)物，加入酶標(biāo)記二抗結(jié)合一抗，充分洗滌后加入底物顯色，顯色強(qiáng)度隨樣本中目標(biāo)指標(biāo)濃度升高而降低，通過酶標(biāo)儀檢測吸光度并對照標(biāo)準(zhǔn)曲線，可定量檢測樣本中8-異構(gòu)前列腺素F2α的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒
英文名稱：8-epi-PGF2偽 ELISA Kit
貨號：Y-E2534
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測靈敏度0.12pg/mL，適配氧化應(yīng)激相關(guān)前列腺素標(biāo)志物檢測
檢測范圍：0.4pg/mL - 150pg/mL，覆蓋人體氧化損傷梯度表達(dá)范圍
反應(yīng)時間：標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)時長110分鐘，分步溫育，結(jié)合充分
保存條件：2-8℃避光密封保存，所有試劑避免光照、高溫環(huán)境
有效期：原裝有效期9個月，開封后30天內(nèi)使用
特異性：特異性結(jié)合8-epi-PGF2α，與天然前列腺素及異構(gòu)體無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤7.2%，板間CV≤9.2%，數(shù)據(jù)穩(wěn)定可靠
注意事項：血清、尿液樣本需預(yù)處理除雜；顯色過程嚴(yán)格避光，禁止超時反應(yīng)，保證檢測精準(zhǔn)度
通用注意事項：
樣本要求
血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會導(dǎo)致抗原降解，檢測值偏低。
溫度控制
孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。
避光操作
TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標(biāo)樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。
洗板規(guī)范
洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。
污染防控
實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。
安全防護(hù)
終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。
失效判定
試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。
稀釋校正
樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。
空白對照
空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。
儲存禁忌
試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：
樣本處理：血漿樣本室溫融化，低速離心去除絮狀沉淀；標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶后梯度稀釋配制標(biāo)準(zhǔn)系列。
上樣加液：空白孔加入稀釋緩沖液 50μL，標(biāo)準(zhǔn)品孔與樣本孔各加入待測液 50μL。
一步加入酶結(jié)合物：全部孔加入酶標(biāo)記抗體工作液 100μL，封板混勻。
孵育反應(yīng)：37℃避光孵育 66min。
洗板操作：洗滌液浸洗每孔 30s，重復(fù) 5 次，吸干殘留液體。
底物顯色：顯色混合液 100μL / 孔，37℃避光顯色 15min。
終止定量：終止液終止顯色，450nm 測定吸光度，換算樣本 8-epi-PGF2α 濃度。
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關(guān)鍵字： 人8-異構(gòu)前列腺素F2α;8-epi-PGF2α;ELISA試劑盒;
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