本試劑盒以雙抗體夾心ELISA原理為檢測(cè)基礎(chǔ)，酶標(biāo)板微孔內(nèi)固定大鼠TSC22特異性捕獲抗體。孵育反應(yīng)時(shí)，待測(cè)樣本、梯度標(biāo)準(zhǔn)品中的大鼠TSC22抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗板去除未結(jié)合雜質(zhì)蛋白后，加入酶標(biāo)記的TSC22檢測(cè)抗體，形成夾心免疫復(fù)合物。通過(guò)TMB底物的酶促顯色反應(yīng)產(chǎn)生有色產(chǎn)物，吸光度大小與樣本中TSC22含量成正比，終止反應(yīng)后檢測(cè)讀數(shù)，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)即可定量檢測(cè)目標(biāo)蛋白濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1043 |
英文名稱(chēng) | TSC22 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)濃度≤0.5ng/mL
檢測(cè)范圍：1ng/mL - 90ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：總反應(yīng)120分鐘（37℃孵育60min、酶反應(yīng)30min、顯色30min）
保存條件：2-8℃密封避光保存，開(kāi)封試劑1個(gè)月內(nèi)用完
有效期：12個(gè)月
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm/630nm雙波長(zhǎng)校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制：梯度標(biāo)準(zhǔn)品擬合曲線(xiàn)，R2≥0.990
注意事項(xiàng)：細(xì)胞樣本需充分裂解離心，去除雜質(zhì)后上機(jī)檢測(cè)
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書(shū)，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
1. 試劑盒組分室溫復(fù)溫 34min，稀釋濃縮洗滌液，待測(cè)樣本離心去除顆粒物雜質(zhì)，酶標(biāo)板按實(shí)驗(yàn)需求拆分。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品孔梯度添加 TSC22 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔上樣 50μL 待測(cè)樣本，空白孔補(bǔ)加稀釋緩沖液。
3. 各孔加入酶偶聯(lián)工作液 100μL，封板膜密封，震蕩混勻 10s，37℃恒溫孵育 72min。
4. 洗板 5 次，洗滌液浸泡 35s 每輪，甩干廢液后吸水紙拍干板孔。
5. 避光添加顯色液 A、B 各 50μL，37℃避光顯色 19min。
6. 滴加終止液 50μL 混勻終止反應(yīng)。
7. 酶標(biāo)儀 450nm 檢測(cè)吸光值，計(jì)算 TSC22 蛋白濃度。
關(guān)鍵字： 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β刺激蛋白22;TSC22;ELISA試劑盒;
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