本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，微孔板預(yù)先包被人apelin 13特異性捕獲抗體，加入梯度標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本后，樣本中的AP13抗原與固相抗體特異性結(jié)合，孵育結(jié)束后洗板去除未結(jié)合組分，加入酶標(biāo)記AP13檢測(cè)抗體形成免疫夾心復(fù)合物，充分洗滌后加入底物顯色液發(fā)生酶促顯色反應(yīng)，產(chǎn)物顏色深淺與樣本中AP13含量成正比，通過(guò)酶標(biāo)儀讀數(shù)并擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，可精準(zhǔn)定量apelin 13的濃度。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人apelin 13(AP13)ELISA試劑盒

英文名稱：AP13 ELISA Kit 96T/48T
貨號(hào)：Y-E2517

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測(cè)0.05ng/mL，超高靈敏度適配心血管調(diào)控肽檢測(cè)

檢測(cè)范圍：0.1ng/mL - 35ng/mL，覆蓋心血管、代謝相關(guān)表達(dá)區(qū)間

反應(yīng)時(shí)間：全程實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)100分鐘，流程標(biāo)準(zhǔn)化，控溫精準(zhǔn)

保存條件：2-8℃避光冷藏保存，小分子肽試劑密封防揮發(fā)

有效期：未開(kāi)封有效期8個(gè)月，開(kāi)封后25天內(nèi)用完

特異性：特異性識(shí)別apelin 13肽段，與apelin其他亞型無(wú)交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)CV≤6.5%，板間CV≤8.5%，重復(fù)性優(yōu)異

注意事項(xiàng)：血清樣本新鮮采集、低溫保存；顯色避光操作，終止后立即讀數(shù)，保證數(shù)據(jù)精準(zhǔn)
試劑盒組成：

預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物

標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)

生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)

辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化

終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果

濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)

封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

樣本前處理：血漿樣本 EDTA 抗凝處理后離心取上清，不可反復(fù)凍融；標(biāo)準(zhǔn)品粉劑溶解后梯度稀釋配制 5 組標(biāo)準(zhǔn)梯度液。

加樣入孔：空白孔添加稀釋緩沖液 50μL，標(biāo)準(zhǔn)孔與樣本孔分別加入待測(cè)液體 50μL。

一步加入酶結(jié)合工作液：每孔加入酶標(biāo)記競(jìng)爭(zhēng)抗體 100μL，封板輕微震蕩板面。

溫育孵育：37℃避光孵育 60min。

洗板除雜：洗滌液浸泡每孔 30s，連續(xù)洗板 5 次，徹底拍干殘留液體。

底物顯色：TMB 顯色混合液 100μL / 孔，避光顯色 14min。

終止定量：加入終止液終止反應(yīng)，酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定吸光度，計(jì)算 AP13 含量。
公司正在出售的產(chǎn)品：