本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，預(yù)先將特異性AP36抗體包被于酶標(biāo)板微孔內(nèi)，樣本、標(biāo)準(zhǔn)品中的人Apelin 36抗原會(huì)與包被抗體特異性結(jié)合，再加入酶標(biāo)記二抗形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，徹底洗去未結(jié)合的游離物質(zhì)后，加入底物顯色液進(jìn)行顯色反應(yīng)，通過終止液終止反應(yīng)，最終利用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔吸光度值，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線即可精準(zhǔn)計(jì)算樣本中人Apelin 36的含量。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人Apelin 36(AP36)ELISA試劑盒

英文名稱：AP12 ELISA Kit 96T/48T
貨號(hào)：Y-E2518

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測(cè)濃度可達(dá)0.1ng/mL，可精準(zhǔn)檢測(cè)樣本中微量AP36含量，無基底干擾

檢測(cè)范圍：0.25ng/mL - 8ng/mL，覆蓋人體生理及病理狀態(tài)下AP36常規(guī)表達(dá)濃度區(qū)間

反應(yīng)時(shí)間：整體孵育反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)90分鐘，包含樣本結(jié)合、酶聯(lián)反應(yīng)、顯色全過程

保存條件：試劑盒未開封組分2-8℃冷藏保存，避光防潮，嚴(yán)禁冷凍

有效期：未開封密封狀態(tài)下有效期6個(gè)月，開封后1個(gè)月內(nèi)用完

特異性：僅特異性識(shí)別人體AP36蛋白，與Apelin其他亞型及同源蛋白無交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)CV≤6%，板間變異系數(shù)CV≤8%，檢測(cè)穩(wěn)定性優(yōu)異

注意事項(xiàng)：樣本需避免反復(fù)凍融，顯色反應(yīng)需嚴(yán)格避光，終止液加入順序不可顛倒，實(shí)驗(yàn)耗材需無熱源無污染
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：

實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異

所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）

避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用

洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果

顯色過程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

提前將試劑盒所有試劑、待測(cè)樣本從冷藏環(huán)境取出，室溫平衡 30min，配制洗滌工作液、標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋液，標(biāo)記酶標(biāo)板對(duì)應(yīng)孔位（標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔、空白孔）。

標(biāo)準(zhǔn)品孔每孔加入 50μL 梯度稀釋好的 AP36 標(biāo)準(zhǔn)品溶液，待測(cè)樣本孔每孔加入 50μL 預(yù)處理完畢的人血清 / 組織上清待測(cè)樣品，空白對(duì)照孔僅加入等量樣本稀釋液，全程避免孔內(nèi)產(chǎn)生氣泡。

每孔直接加入 100μL 預(yù)先混合好的酶結(jié)合物工作液（一步法預(yù)混酶標(biāo)二抗 + 顯色輔助液），封板膜密封酶標(biāo)板，置于 37℃恒溫孵育箱避光孵育 60min。

揭去封板膜，倒掉孔內(nèi)全部液體，每孔加滿洗滌緩沖液，靜置 30s 后甩干液體，重復(fù)洗板 5 次，每次洗板后在吸水紙上拍干殘余液體。

洗板完成后無需換液，每孔加入 90μL TMB 單組分顯色底物液，37℃避光恒溫顯色 15min，密切觀察標(biāo)準(zhǔn)品孔顏色梯度變化。

顯色終止后快速向每孔滴加 50μL 終止反應(yīng)液，輕柔晃動(dòng)酶標(biāo)板 10s 混勻液體，終止酶促顯色反應(yīng)。

15min 內(nèi)使用酶標(biāo)儀設(shè)置 450nm 主波長(zhǎng)、630nm 參比波長(zhǎng)讀取各孔 OD 吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度與對(duì)應(yīng) OD 值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本中 AP36 實(shí)際濃度。
公司正在出售的產(chǎn)品：