本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA核心原理，將高特異性人CD4抗體包被于酶標(biāo)板微孔，孵育時樣本及標(biāo)準(zhǔn)品中的CD4抗原與固相抗體特異性結(jié)合，加入酶標(biāo)記配對抗體形成免疫夾心復(fù)合物，充分洗板后進行TMB底物顯色，終止顯色后檢測吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線對應(yīng)關(guān)系精準(zhǔn)定量樣本中CD4分子的含量。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人CD4分子(CD4)ELISA試劑盒

英文名稱：CD4  Elisa Kit
貨號：Y-E063

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測濃度0.1ng/mL，超靈敏檢測T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物

檢測范圍：0.3ng/mL - 14ng/mL，適配免疫血清、淋巴細(xì)胞樣本定量檢測

反應(yīng)時間：完整實驗反應(yīng)85分鐘，檢測快速精準(zhǔn)

保存條件：全套試劑2-8℃恒溫避光保存，嚴(yán)禁冷凍

有效期：原裝未開封有效期12個月，開封后25天內(nèi)使用完畢

特異性：專一識別人CD4分子，不與CD8、CD3等T細(xì)胞標(biāo)志物交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)CV≤4%，板間CV≤6%，免疫標(biāo)志物檢測穩(wěn)定性極佳

注意事項：樣本采集后低溫保存，避免T細(xì)胞凋亡導(dǎo)致CD4分子流失，實驗全程無菌操作
實驗前準(zhǔn)備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。

取出本次實驗所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記

酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
實驗步驟如下：

試劑室溫回溫 31min，稀釋濃縮洗滌液，配制 CD4 梯度標(biāo)準(zhǔn)液，標(biāo)記酶標(biāo)板各類檢測孔位。

標(biāo)準(zhǔn)品孔加入 50μL 梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品，樣本孔加入 50μL 淋巴細(xì)胞懸液上清樣本，空白孔補稀釋液。

所有孔加入 100μL 一步法酶結(jié)合預(yù)混液，封板避光 37℃孵育 57min。

棄廢液，洗滌液浸泡洗板 5 次，單次 30s，充分拍干板內(nèi)殘留洗液。

每孔加入顯色底物 90μL，37℃避光顯色 16min。

逐孔添加 50μL 終止液，搖晃混勻終止酶促反應(yīng)。

酶標(biāo)儀 450nm 檢測 OD 值，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量 CD4 分子含量。
公司正在出售的產(chǎn)品：