本試劑盒采用間接ELISA檢測(cè)原理，酶標(biāo)板固相包被猴B病毒（BV）特異性抗原，待測(cè)樣本中的猴B病毒抗體可與固相抗原特異性結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合雜質(zhì)后，加入酶標(biāo)記抗物種二抗進(jìn)行結(jié)合反應(yīng)，經(jīng)底物顯色產(chǎn)生特異性顯色信號(hào)，顯色強(qiáng)度與樣本中BV抗體含量呈正相關(guān)，通過(guò)吸光度檢測(cè)及標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)比對(duì)，可定量檢測(cè)樣本中猴B病毒抗體水平。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低病毒抗體檢出閾值1:100，可早期精準(zhǔn)檢測(cè)猴B病毒隱性感染樣本。

檢測(cè)范圍：適配猴血清樣本B病毒抗原、抗體定性定量檢測(cè)，覆蓋感染初期、高峰期濃度梯度。

反應(yīng)時(shí)間：總實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)110分鐘，病毒樣本孵育50分鐘，顯色穩(wěn)定20分鐘。

保存條件：2-8℃密封避光保存，病毒檢測(cè)試劑嚴(yán)禁室溫久置。

有效期：原裝未開(kāi)封有效期12個(gè)月。

特異性：特異性識(shí)別猴B病毒，與猴皰疹病毒、其他人畜共患病毒無(wú)交叉反應(yīng)。

重復(fù)性：板內(nèi)CV≤6%，板間CV≤8%，動(dòng)物檢疫檢測(cè)數(shù)據(jù)穩(wěn)定。

注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)需在生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室操作，樣本嚴(yán)格滅活處理；避免氣溶膠污染。
通用注意事項(xiàng)：

樣本要求

血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會(huì)導(dǎo)致抗原降解，檢測(cè)值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動(dòng)、室溫過(guò)低會(huì)降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類(lèi)靶標(biāo)樣本見(jiàn)光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會(huì)造成高背景、假陽(yáng)性；拍干時(shí)使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實(shí)驗(yàn)耗材無(wú) DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護(hù)

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實(shí)驗(yàn)廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無(wú)明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時(shí)，必須稀釋重測(cè)，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測(cè)限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對(duì)照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說(shuō)明洗滌不充分或試劑污染，實(shí)驗(yàn)作廢重做。

儲(chǔ)存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會(huì)造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

試劑盒室溫平衡 31min，稀釋洗滌液，取出包被微孔板，編排樣本加樣順序。

設(shè)置陰陽(yáng)性對(duì)照、梯度標(biāo)準(zhǔn)品，猴待測(cè)樣本上清稀釋?zhuān)靠准?/span> 50μL 對(duì)應(yīng)液體。

所有孔直接加入酶標(biāo)記抗原工作液 100μL，封板密封防止揮發(fā)。

37℃避光孵育 62min，競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合固相抗體位點(diǎn)。

洗板 6 次，每孔加滿(mǎn)洗滌液靜置 29s，拍干微孔去除未結(jié)合試劑。

避光加入顯色 AB 液各 50μL，搖勻后 37℃顯色 14min。

終止液終止顯色，酶標(biāo)儀 450nm 讀數(shù)，結(jié)合對(duì)照判定猴 B 病毒感染情況并定量。