本試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心ELISA原理，固相酶標(biāo)板固定純化的人RCOR3特異性捕獲抗體，加入標(biāo)準(zhǔn)品和待測生物樣本，樣本中的REST協(xié)阻抑因子3與固相抗體特異性結(jié)合，充分洗滌后加入HRP標(biāo)記的RCOR3檢測抗體，形成穩(wěn)定的免疫復(fù)合物，經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后檢測吸光度，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線定量測定樣本中RCOR3的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)ELISA試劑盒
英文名稱：RCOR3 ELISA Kit
貨號：Y-E2601
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測值≤0.08ng/mL，適配低表達(dá)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的微量檢測
檢測范圍：0.5-32ng/mL，覆蓋人體組織、細(xì)胞中RCOR3正常及異常表達(dá)濃度
反應(yīng)時(shí)間：標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)反應(yīng)時(shí)長3.2h，孵育時(shí)間充足，保證抗原抗體充分結(jié)合
保存條件：所有試劑2-8℃避光保存，開封后試劑密封保存，避免受潮、污染，禁止低溫冷凍
有效期：未開封有效期6個(gè)月，開蓋后建議2周內(nèi)用完，防止抗體活性下降
特異性：特異性識別人源RCOR3蛋白，與REST家族其他輔抑制因子無交叉反應(yīng)，無非特異性結(jié)合
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)＜7%，板間變異系數(shù)＜9%，檢測穩(wěn)定性極佳
注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)全程避光操作，顯色試劑對光線敏感；樣本需無蛋白降解、無核酸污染；加樣順序、加樣量需精準(zhǔn)統(tǒng)一，減少系統(tǒng)誤差；孵育溫度恒定在37℃，溫度波動(dòng)會(huì)影響結(jié)合效率；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后及時(shí)清洗酶標(biāo)板，避免殘留試劑腐蝕板孔
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒全部組分室溫放置 33min，稀釋濃縮洗滌液，凍干標(biāo)準(zhǔn)品充分溶解梯度稀釋，酶標(biāo)板分孔標(biāo)記。
空白孔加注稀釋液，標(biāo)準(zhǔn)品孔加入梯度標(biāo)準(zhǔn)溶液，樣本孔加入離心澄清待測樣本，嚴(yán)格控制加樣體積。
直接向所有微孔加入酶標(biāo)記檢測工作液，不吸棄原有液體，封板膜封口。
37℃避光孵育 72min，酶標(biāo)板水平放置防止液體溢出。
揭膜倒凈廢液，洗滌液浸泡微孔 42s，循環(huán)洗板 5 次，吸水紙徹底吸干微孔殘留液體。
加入顯色 A、B 液，37℃避光顯色 19min，出現(xiàn)明顯顏色梯度即可終止。
滴加終止液混勻，酶標(biāo)儀 450nm 檢測吸光度，定量 RCOR3 指標(biāo)濃度。
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關(guān)鍵字： 人REST協(xié)阻抑因子3;RCOR3;ELISA試劑盒;
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