本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA技術(shù)檢測樣本中人骨髓抑制因子1含量。試劑盒固相載體包被MPIF-1/CCL23特異性捕獲抗體，加入待測樣本后，樣本中的目標(biāo)細(xì)胞因子與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除游離雜質(zhì)，加入酶標(biāo)記配對檢測抗體形成免疫復(fù)合物，經(jīng)底物催化顯色后，顯色強(qiáng)度與樣本中MPIF-1/CCL23濃度呈正相關(guān)，可精準(zhǔn)檢測該骨髓調(diào)控因子的表達(dá)水平。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢出 0.04pg/mL

檢測范圍：0.09~5.76pg/mL

反應(yīng)時間：捕獲孵育 98min，酶標(biāo)二抗 62min，顯色 15min

顯色系統(tǒng)：即用型 TMB 顯色液

檢測波長：450nm，參比 630nm

特異性：對其他 CC 類趨化因子交叉反應(yīng)＜4%

重復(fù)性：板內(nèi) CV＜6.5%，板間 CV＜8.5%

注意事項(xiàng)：外周血單核細(xì)胞上清樣本 4℃短期保存，不可室溫久放
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。

取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記

酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

試劑室溫平衡 37min，梯度稀釋 MPIF-1 重組標(biāo)準(zhǔn)蛋白，排布待測體液樣本孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、空白孔。

每孔加入 50μL 預(yù)處理待測樣本，標(biāo)準(zhǔn)孔添加梯度標(biāo)準(zhǔn)液，空白孔補(bǔ)稀釋液。

一步法加入酶偶聯(lián)抗 CCL23 抗體 100μL，封板密封，37℃孵育 74min 完成免疫捕獲。

洗板 4 輪，每輪洗滌浸泡 46s，倒扣板條徹底去除廢液。

加入顯色底物混合液 100μL，37℃避光顯色 17min。

加入終止液 50μL 終止催化顯色，輕震微孔板混勻液體。

450nm 測定吸光度，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線計算因子濃度。