本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)，酶標(biāo)板微孔包被抗人RND1特異性抗體，加入梯度標(biāo)準(zhǔn)品及待測樣本，樣本中的Rho家族GTP酶1與固相抗體特異性結(jié)合，孵育洗滌后加入HRP標(biāo)記的RND1檢測抗體，構(gòu)建特異性免疫夾心復(fù)合物，經(jīng)顯色、終止反應(yīng)后檢測吸光度，定量分析樣本中RND1蛋白的表達(dá)濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人Rho家族GTP酶1(RND1)ELISA試劑盒
英文名稱：RND1 Elisa Kit
貨號：Y-E895
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測濃度≤0.12ng/mL，可有效檢測低豐度RND1GTP酶蛋白
檢測范圍：1.0-64ng/mL，適配細(xì)胞遷移、腫瘤侵襲相關(guān)樣本檢測
反應(yīng)時間：整體反應(yīng)時長2.6h，操作簡便，反應(yīng)速率穩(wěn)定
保存條件：試劑盒2-8℃避光防潮保存，濃縮洗滌液低溫靜置可能出現(xiàn)結(jié)晶，溫水溶解混勻后即可使用，禁止冷凍試劑盒
有效期：未開封有效期6個月，符合儲存條件可全程保持檢測性能穩(wěn)定
特異性：特異性結(jié)合人RND1蛋白，與Rho家族其他GTP酶無明顯交叉反應(yīng)，檢測專一性強(qiáng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)＜10%，板間變異系數(shù)＜12%，重復(fù)性符合科研檢測標(biāo)準(zhǔn)
注意事項(xiàng)：結(jié)晶洗滌液必須完全溶解混勻后使用，避免洗滌不均影響結(jié)果；樣本避免反復(fù)凍融，防止蛋白結(jié)構(gòu)破壞；標(biāo)準(zhǔn)品現(xiàn)配現(xiàn)用，不可隔夜存放；不同批次試劑盒組分不可混用；實(shí)驗(yàn)環(huán)境需潔凈，避免粉塵、雜菌污染
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
實(shí)驗(yàn)前室溫復(fù)溫試劑盒 30min，配制洗滌工作液，溶解標(biāo)準(zhǔn)品并設(shè)置 5 個濃度梯度，規(guī)劃酶標(biāo)板布局。
空白孔添加樣本稀釋液，標(biāo)準(zhǔn)孔加入對應(yīng)濃度標(biāo)準(zhǔn)品，樣本孔加入預(yù)處理待測樣本，完成加樣步驟。
直接添加酶標(biāo)記抗體液至各微孔，輕震酶標(biāo)板混勻體系，封板密封。
37℃避光孵育 64min，全程避光避免底物提前分解。
去除封板倒掉廢液，洗滌液浸泡微孔 34s，洗板 5 次后拍干微孔。
加入顯色底物避光反應(yīng) 15min，觀察顯色梯度分層清晰。
加入終止液終止顯色，450nm 測定 OD 值，計算樣本 RND1 蛋白濃度。
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關(guān)鍵字： 人Rho家族GTP酶1;RND1;ELISA試劑盒;
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