本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)技術(shù)，酶標(biāo)板預(yù)先包被人GTP酶活化蛋白特異性抗體，加入梯度標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本，樣本中的GAP蛋白與固相抗體發(fā)生特異性免疫結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后，加入HRP標(biāo)記的GAP檢測(cè)抗體，形成穩(wěn)定的免疫復(fù)合物，經(jīng)TMB顯色、終止反應(yīng)后測(cè)定OD值，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中GAP蛋白的含量。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA試劑盒

英文名稱：GAP  Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E781

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測(cè)值0.12ng/mL，適配細(xì)胞信號(hào)通路蛋白檢測(cè)

檢測(cè)范圍：0.25ng/mL - 28ng/mL，覆蓋細(xì)胞增殖、分化相關(guān)樣本表達(dá)區(qū)間

反應(yīng)時(shí)間：實(shí)驗(yàn)總時(shí)長(zhǎng)90分鐘

保存條件：2-8℃密封冷藏，嚴(yán)禁冷凍，防止蛋白構(gòu)象改變

有效期：原裝未拆封有效期12個(gè)月

特異性：特異性結(jié)合人GAP蛋白，與GTP酶家族其他調(diào)控蛋白無(wú)交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均＜8%

注意事項(xiàng)：組織樣本充分勻漿裂解，去除雜質(zhì)；避免樣本反復(fù)凍融
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見(jiàn) 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說(shuō)明書(shū)梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測(cè)樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長(zhǎng)，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動(dòng)洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無(wú)核酸酶、無(wú)熱源、無(wú)蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。

取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記

酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

試劑盒試劑室溫平衡 35min，稀釋洗滌液；GAP 標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋，組織裂解液樣本離心取澄清上清。

包被板分孔加標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)上清 100μL，空白孔添加樣本稀釋液。

一步添加酶標(biāo)記二抗工作液 100μL，混勻封板。

37℃孵育 75min，保持孵育濕度。

洗板 5 次，每次浸泡 40s，吸干殘留洗液。

顯色液避光顯色 19min。

終止液終止反應(yīng)，450nm 讀數(shù)定量 GAP 蛋白含量。
公司正在出售的產(chǎn)品：