本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA技術(shù)原理，96孔微孔板固相包被人生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43(GAP-43)特異性抗體，檢測(cè)時(shí)加入待測(cè)樣本與標(biāo)準(zhǔn)品，樣本中的GAP-43抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合組分后加入酶標(biāo)記二抗，形成夾心免疫復(fù)合物，經(jīng)TMB底物顯色、終止反應(yīng)后，檢測(cè)特定波長(zhǎng)吸光度，吸光度值與樣本中GAP-43蛋白含量成正比，依托標(biāo)準(zhǔn)曲線完成定量檢測(cè)。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱(chēng)：人生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43(GAP-43)ELISA試劑盒
英文名稱(chēng)：GAP-43 ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E3503
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最小檢出 0.47ng/mL
檢測(cè)范圍：2.8ng/mL ~ 950ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：37℃溫育 92min，酶標(biāo)記二抗 60min，避光顯色 25min，總時(shí)長(zhǎng) 3h17min
保存條件：試劑盒主體 2~8℃，終止液常溫密閉存放，板條開(kāi)封后必須密封防潮
顯色系統(tǒng)：?jiǎn)谓M分 TMB 底物顯色，1N 硫酸終止反應(yīng)
檢測(cè)波長(zhǎng)：僅 450nm 讀取吸光度數(shù)值
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：最小二乘法線性擬合，8 個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品梯度點(diǎn)
注意事項(xiàng)：腦組織勻漿樣本需充分離心去除組織沉淀；全程防止底物接觸金屬器具導(dǎo)致提前變色
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒所有試劑室溫靜置 21min，稀釋濃縮洗滌液，梯度稀釋 GAP-43 標(biāo)準(zhǔn)品，劃分酶標(biāo)板孔。
標(biāo)準(zhǔn)孔加入 50μL 梯度標(biāo)準(zhǔn)液；樣本孔加 50μL 稀釋液 + 10μL 待測(cè)樣本；空白孔不加液體。
除空白孔外每孔加入酶標(biāo)記抗體工作液 100μL，封板 37℃孵育 59min。
棄去孔內(nèi)液體，洗滌液加滿每孔靜置 30s，甩干循環(huán) 5 次，板條拍干。
顯色 A、B 液各 50μL 每孔添加，混勻避光顯色 12min。
加入終止液 50μL 混勻終止反應(yīng)。
酶標(biāo)儀 450nm 讀數(shù)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 GAP-43 含量。
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關(guān)鍵字： 人生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43;GAP-43;ELISA試劑盒;
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