本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，利用固相載體包被特異性抗體，樣本中的牛丙酮與固相抗體發(fā)生特異性結(jié)合競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)，通過(guò)加入酶標(biāo)記物、底物顯色，樣本中牛丙酮含量與顯色深淺呈負(fù)相關(guān)，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)應(yīng)的吸光度值，即可精準(zhǔn)計(jì)算樣本中牛丙酮的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 牛丙酮檢測(cè)(acetone)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E3449 |
英文名稱 | Bovine acetone ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)濃度可達(dá)0.1mmol/L，可精準(zhǔn)識(shí)別樣本中微量丙酮含量，無(wú)假陰性檢出情況
檢測(cè)范圍：0.2mmol/L - 10mmol/L，覆蓋牛血清、組織液、乳汁中丙酮常規(guī)檢測(cè)濃度區(qū)間
反應(yīng)時(shí)間：整體實(shí)驗(yàn)操作時(shí)長(zhǎng)90分鐘，包含樣本孵育、洗板、顯色、終止全流程
保存條件：試劑盒未開(kāi)封狀態(tài)2-8℃冷藏保存，嚴(yán)禁冷凍；開(kāi)封后板條密封置于2-8℃存放
有效期：未開(kāi)封原裝試劑盒有效期6個(gè)月，嚴(yán)格按儲(chǔ)存條件存放可保障性能穩(wěn)定
特異性：僅特異性識(shí)別牛丙酮分子，與牛體內(nèi)乳酸、乙酸、葡萄糖等常見(jiàn)代謝物無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)CV≤6%，板間變異系數(shù)CV≤8%，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性良好
注意事項(xiàng)：樣本需避免溶血、脂血，溶血樣本會(huì)干擾顯色反應(yīng)；實(shí)驗(yàn)全程使用無(wú)酶無(wú)菌耗材，洗板需徹底，避免非特異性吸附影響結(jié)果；試劑使用前需平衡至室溫，禁止高溫加熱試劑。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
提前將試劑盒所有組分置于室溫環(huán)境平衡 30min，配制洗滌工作液、樣本稀釋液，取出酶標(biāo)板預(yù)留所需孔位，剩余板條密封冷藏保存。
設(shè)置空白對(duì)照孔、標(biāo)準(zhǔn)品梯度孔、待測(cè)樣本孔，每孔依次加入對(duì)應(yīng)梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品、稀釋后待測(cè)樣本，空白孔僅加樣本稀釋液，每孔加樣量嚴(yán)格統(tǒng)一。
一步法直接向所有孔內(nèi)同步加入酶結(jié)合工作液，輕輕震蕩酶標(biāo)板混勻孔內(nèi)液體，覆膜封板避免液體蒸發(fā)與交叉污染。
恒溫孵育箱 37℃避光孵育 60min，期間禁止挪動(dòng)酶標(biāo)板，防止孔內(nèi)反應(yīng)體系晃動(dòng)影響抗原抗體結(jié)合效率。
揭去封板膜，快速棄去孔內(nèi)全部反應(yīng)液，每孔加滿洗滌洗滌液浸泡 30s 后拍干，重復(fù)洗板 5 次，最后一次徹底拍凈孔內(nèi)殘留液體。
每孔精準(zhǔn)加入顯色底物 A 液與 B 液，避光室溫顯色 15min，肉眼觀察標(biāo)準(zhǔn)品孔呈現(xiàn)清晰梯度藍(lán)色即為顯色正常。
每孔加入終止液終止酶促顯色反應(yīng)，輕板混勻，15min 內(nèi)使用酶標(biāo)儀設(shè)定對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)讀取各孔 OD 值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本丙酮濃度。
關(guān)鍵字： 牛丙酮檢測(cè);acetone;ELISA試劑盒;
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