本試劑盒采用特異性雙抗體夾心ELISA檢測原理，酶標板微孔包被人促胃液素受體特異性抗體，樣本中含有的GsaR抗原與包被抗體特異性結(jié)合，洗滌去除非特異性結(jié)合物后，加入酶標記配對抗體形成穩(wěn)定的免疫夾心復合物，經(jīng)底物顯色、終止反應后，利用酶標儀檢測吸光度，結(jié)合標準曲線定量分析樣本中人促胃液素受體的表達含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人促胃液素受體(GsaR)ELISA試劑盒
英文名稱：GsaR Elisa Kit
貨號：Y-E369
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢出 0.08ng/mL
檢測范圍：0.2ng/mL - 8ng/mL
反應時間：樣本孵育 80min，二抗 50min，底物顯色 18min，合計 148min
顯色系統(tǒng)：HRP 標記 TMB 顯色，酸性終止液終止
檢測波長：450nm
特異性：特異性靶向促胃液素受體，與胃動素受體無交叉識別
重復性：板內(nèi) CV＜7.2%，板間 CV＜8.8%
注意事項：組織勻漿樣本需離心去除沉淀，避免雜質(zhì)干擾顯色；開封后板條密封防潮保存
試劑盒組成：
預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標物，提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實驗步驟如下：
試劑盒室溫平衡 28min，配制 1× 洗滌緩沖液，取出酶標板并劃分標品孔、樣本孔、空白孔組別。
梯度稀釋 GsaR 標準品并每孔加液 50μL；組織裂解 / 血清待測樣本稀釋后加入樣本孔 50μL；空白孔補稀釋液。
各孔加入酶偶聯(lián)抗體工作液 100μL，封板膜嚴實封口，前后輕搖酶標板混勻。
37℃恒溫避光孵育 55min，放置過程中避免挪動酶標板。
手動洗板 5 輪，每輪洗滌液浸潤微孔 30s，倒扣瀝干液體，吸水紙按壓板底除水。
避光添加顯色 A 液、B 液各 50μL，混勻后 37℃避光顯色 18min。
加入終止液 50μL 終止反應，450nm 波長測吸光值，依托標準曲線計算樣本 GsaR 表達量。
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