本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)原理，酶標(biāo)板預(yù)先包被人促胰液素特異性單克隆抗體，樣本和標(biāo)準(zhǔn)品中的Secretin抗原與固相抗體特異性結(jié)合，孵育結(jié)束后洗除游離雜質(zhì)，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗Secretin抗體，形成免疫復(fù)合物，催化底物顯色，終止后檢測(cè)吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算樣本中促胰液素的含量。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱(chēng)：人促胰液素/胰泌素(Secretin)ELISA試劑盒

英文名稱(chēng)：Secretin Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E367

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測(cè) 5pg/mL

檢測(cè)范圍：12pg/mL - 480pg/mL

反應(yīng)時(shí)間：樣本孵育 55min，二抗 30min，顯色 14min，總 99min

顯色系統(tǒng)：?jiǎn)纹垦b即用型 TMB 顯色試劑

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm

特異性：與 VIP、胰高血糖素交叉反應(yīng)率＜2%

重復(fù)性：板內(nèi) CV＜6.3%，板間 CV＜7.7%

注意事項(xiàng)：血漿樣本建議添加抑肽酶防止肽類(lèi)降解，加樣時(shí)避免產(chǎn)生氣泡影響吸光度
通用注意事項(xiàng)：

樣本要求

血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會(huì)導(dǎo)致抗原降解，檢測(cè)值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動(dòng)、室溫過(guò)低會(huì)降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類(lèi)靶標(biāo)樣本見(jiàn)光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會(huì)造成高背景、假陽(yáng)性；拍干時(shí)使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實(shí)驗(yàn)耗材無(wú) DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護(hù)

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實(shí)驗(yàn)廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無(wú)明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時(shí)，必須稀釋重測(cè)，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測(cè)限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對(duì)照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說(shuō)明洗滌不充分或試劑污染，實(shí)驗(yàn)作廢重做。

儲(chǔ)存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會(huì)造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

試劑室溫復(fù)溫 32min，配制工作洗滌液，拆分酶標(biāo)板，未使用板條密封置于 2-8℃冷藏保存。

標(biāo)準(zhǔn)品孔加入梯度 Secretin 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，待測(cè)樣本稀釋后加樣 50μL，空白對(duì)照孔僅添加樣本稀釋液。

每孔加入酶標(biāo)記抗體工作液 100μL，封板密封，水平晃動(dòng)酶標(biāo)板混勻體系。

37℃恒溫孵育 50min，全程避光防止酶標(biāo)記物失活。

洗板操作重復(fù) 4 次，每次浸泡 40s，倒空廢液后充分拍干微孔。

避光添加顯色液 A、B 各 50μL，混勻后室溫避光顯色 14min。

加入終止液終止反應(yīng)，酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定 OD 值，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算胰泌素含量。
公司正在出售的產(chǎn)品：