本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，微孔板表面包被人促有絲分裂因子特異性捕獲抗體，待測樣本中的MF/MPF抗原可與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌后加入酶標記檢測抗體構(gòu)建夾心復合物，通過酶催化底物產(chǎn)生顯色反應，終止反應后測定吸光度，對照標準曲線即可定量檢測樣本中促有絲分裂因子的濃度。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA試劑盒

英文名稱：MF/MPF ELISA Kit
貨號：Y-E2664

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：檢出下限 0.15U/L

檢測范圍：0.4U/L - 16U/L

反應時間：孵育 95min，酶結(jié)合物 55min，顯色 22min，全程 172min

顯色系統(tǒng)：HRP 介導 TMB 顯色，硫酸終止

檢測波長：450nm/630nm 雙波長

特異性：特異性識別 MPF 復合物亞基，不與周期蛋白家族其他亞型強結(jié)合

重復性：板內(nèi) CV＜7.8%，板間 CV＜9.3%

注意事項：細胞裂解樣本需充分離心去除細胞碎片，所有步驟嚴格控溫室溫 22-26℃
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設(shè)置雙復孔降低誤差）。
實驗步驟如下：

試劑盒室溫放置 40min，稀釋濃縮洗滌液與標準品稀釋液，規(guī)劃酶標板孔位分區(qū)。

各梯度標準品取 50μL 加入對應微孔，細胞上清 / 組織樣本稀釋后上樣 50μL，空白孔補稀釋液。

所有孔加入酶結(jié)合檢測液 100μL，封板膜密封，震蕩混勻 25s。

37℃密閉孵育 75min，維持孵育箱溫度穩(wěn)定無波動。

洗板 6 次，每次洗滌液浸泡微孔 30s，徹底棄除廢液并拍干板條。

避光加入顯色底物 A、B 液各 50μL，混勻后 37℃避光顯色 22min。

終止液終止顯色反應，450nm 波長檢測吸光度，繪制標準曲線換算 MF/MPF 濃度。
公司正在出售的產(chǎn)品：