本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測技術,酶標板微孔預先包被抗人IL-2sRα特異性捕獲抗體,實驗時樣本及標準品中的IL-2sRα抗原與固相抗體發(fā)生特異性免疫結合,洗板清除未結合的雜蛋白與雜質;隨后加入HRP標記的抗IL-2sRα檢測抗體,構建固相抗體-抗原-酶標抗體的三元復合物,經(jīng)底物TMB顯色、硫酸終止液終止顯色后,酶標儀讀取吸光度值,樣本吸光度與IL-2sRα濃度呈線性正相關,通過標準曲線可精準定量樣本中該受體蛋白的含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E143 |
英文名稱 | IL-2sRα Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢出 0.3 ng/mL
檢測范圍:0.625 ng/mL ~ 40 ng/mL
反應時間:樣本 37℃孵育 1.5h,酶結合物 1h,顯色 12min
顯色系統(tǒng):TMB 顯色底物 A+B 混合使用
檢測波長:450nm
特異性:專一結合 IL-2sRα,不結合 IL-2sRβ、IL-2 本體分子
重復性:板內 CV<6%,板間 CV<9%
注意事項:血清樣本建議 2~8℃短期保存,長期分裝凍存于 - 20℃
試劑盒組成:
預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線,定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結合目標物,提供酶結合位點
辣根過氧化物酶(HRP)標記親和素 1瓶 與生物素結合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物,產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應,穩(wěn)定顯色結果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結合物質
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程:
拆封酶標板條,室溫回溫 20min,按照說明書倍比稀釋標準品,生物樣本離心取上清備用。
各孔加入標準品 / 待測樣本 100μL,空白孔補稀釋液,立刻添加酶標記抗體工作液 50μL,封膜。
37℃水浴孵育 70min,全程避光防止抗體失活。
洗板 6 次,每次洗滌液浸泡 35s,倒扣拍干,杜絕交叉污染。
每孔加入底物顯色液 100μL,室溫避光顯色 16min。
加入終止液 50μL 搖晃混勻終止酶促反應。
酶標儀 450nm 檢測吸光值,根據(jù)標準曲線方程計算 IL-2sRα 具體濃度。
關鍵字: 人白介素2可溶性受體α鏈;IL-2sRα/CD25;ELISA試劑盒;
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