本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)法酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)檢測(cè)樣本中人苯丙氨酸(LPA)含量。由于苯丙氨酸為小分子物質(zhì),無(wú)法采用雙抗體夾心模式,試劑盒固相載體預(yù)包被LPA抗原,待測(cè)樣本中的LPA與固相包被抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合有限的酶標(biāo)特異性抗體,樣本中LPA含量越高,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體越少,后續(xù)底物顯色越淺,經(jīng)酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度后,吸光度值與樣本中LPA濃度呈負(fù)相關(guān),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可定量測(cè)定樣本中苯丙氨酸含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人苯丙氨酸(LPA)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E2652 |
英文名稱(chēng) | LPA ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測(cè)值 0.3μmol/L
檢測(cè)范圍:0.6μmol/L~38μmol/L
反應(yīng)時(shí)間:室溫振蕩孵育 45min,酶結(jié)合物 35min,顯色 12min
顯色系統(tǒng):HRP 催化 TMB 顯色體系
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm,可搭配 570nm 校正背景
特異性:專(zhuān)一結(jié)合 LPA,與酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸無(wú)交叉識(shí)別
重復(fù)性:板內(nèi) CV<5.5%,板間 CV<8.5%
注意事項(xiàng):血清樣本不可溶血,全程避免強(qiáng)光直射標(biāo)準(zhǔn)品,標(biāo)準(zhǔn)品現(xiàn)配現(xiàn)用不可留存
儲(chǔ)存與有效期:
未開(kāi)封整套試劑盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷凍;有效期 12 個(gè)月。
開(kāi)封后保存
剩余酶標(biāo)板條:自封袋密封,內(nèi)置干燥劑 2~8℃避光;1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
濃縮洗滌液:2~30℃常溫保存,結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品:分裝 - 20℃凍存,避免反復(fù)凍融,1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程:
向微孔板各孔依次加入標(biāo)準(zhǔn)品梯度液、預(yù)處理待測(cè)樣本、酶結(jié)合物工作液,封板膜密封后 37℃溫浴 50min,洗板 5 次。
配制洗滌工作液,每孔加滿洗滌液靜置 20s 后倒掉,重復(fù)洗滌操作,倒扣板在吸水紙上拍凈液體。
每孔先后加入顯色底物 A、顯色底物 B,避光避光孵育 10min 進(jìn)行顯色反應(yīng)。
快速加注終止溶液,終止底物催化顯色反應(yīng)。
酶標(biāo)儀調(diào)至 450nm 檢測(cè)波長(zhǎng),讀取所有微孔 OD 值。
利用標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)據(jù)構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算方程參數(shù)。
依據(jù)稀釋倍數(shù)校正樣本檢測(cè)數(shù)值,判定樣本苯丙氨酸濃度范圍。
關(guān)鍵字: 人苯丙氨酸;LPA;ELISA試劑盒;
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